Elite Pharmacy || 2025

هل أصبت بكورونا في فترة الجائحة؟؟

يسرنا أن تكون جزءاً من بحثنا العلمي المعد لنيل درجة الإجازة في الصيدلة والكيمياء الصيدلية..
هذا الاستبيان سري تماماً، ولا يستغرق أكثر من نصف دقيقة، ونحن نقدر جداً وقتك وجهدك 🤍

رابط الاستبيان:
https://docs.google.com/forms/d/e/1FAIpQLScBuS0ZIRUjw4mKWTEEIfyiS8o_3ykifdcslGJTSmDMWwdw7A/viewform?usp=sf_link

يسرنا أن تكون جزءاً من مشروعنا المُعد لنيل الإجازة في كلية الصيدلة_جامعة دمشق 🎓
بعنوان : استخدام الصادات الحيوية في علاج إنتانات الطرق التنفسية العليا.
علما أن هذا الاستبيان سري هدفه خدمة البحث العلمي
المدة المقدرة للاستبيان:2_3 دقائق
شاكرين تعاونكم.
https://docs.google.com/forms/d/1RZFkaDIUFWtgTGGUVllBMp9MO3FEepz3WW4FtYzHOSQ/edit?usp=drivesdk

إدمان الانترنت هو مصطلح شامل يشير إلى الحاجة القهرية لقضاء مدة طويلة من الوقت على الإنترنت، إلى درجة تتأثر بها الصحة وعلاقات الاجتماعية.

مقياس IAT هو المقياس الأكثر اعتماداً لدراسة إدمان الانترنت، يقيس درجة المشاركة في الأنشطة عبر الانترنت باستخدام مقياس ليكرت الخماسي: من 1 (أبداً)، إلى 5 (دائماً).

يقيس هذا الاختبار مدى مشاكل الفرد بسبب استخدام الإنترنت في الروتين اليومي والحياة الاجتماعية والإنتاجية وأنماط النوم والمشاعر. وعلى أساس مجموع الدرجات التي تم الحصول عليها في الاختبار، يتم تصنيف الفرد في واحدة من ثلاث فئات:
- مستخدم متوسط للإنترنت (من 20 إلى 39) يتمتع بالتحكم الكامل في استخدامه؛
- يواجه مشاكل متكررة بسبب الاستخدام المفرط للإنترنت (من 40 إلى 69)؛
- لديه مشاكل كبيرة بسبب استخدام الإنترنت (من 70 إلى 100).

رابط الاختبار:
https://docs.google.com/forms/d/e/1FAIpQLSdTbs3wWdtq2fBJVKdXXECzzh2txiUhG-wZdRv5dk55ovXVDQ/viewform?usp=sf_link

نرجو المشاركة بالاختبار الذي يتكون من 20 سؤالاً بـ 5 خيارات، لا تتجاوز مدة الاختبار الدقيقتان، ونحن نقدر جداً وقتك وجهدك 🤍

أما جلستنا التانية يا شباب المستقبل هيي  معايرة قساوة الماء :
🔷️الماء القاسي هو الماء الذي يحوي كميات كبيرة من شوارد الكالسيوم و المغنزيوم على شكل فحمات و...
🔷️و هو يشكل مشكلة لنا لأنو كل الماء في بلدنا ماء قاسي عدا نبع الفيجة و السن و الينابيع بشكل عام و الو تأثير سلبي على بشرتنا 💔 و شعرنا 💔 و يسبب تكلس الطنجرة و تكلس الحنفية و بتصير تسد و كتير مشاكل 💔
🔷️طبعا لا يجب شرب هذه المياه اذا تجاوزت حد معين من القساوة .
🔷️طريقة العمل :معايرة الكالسيوم او المغنزيوم بمقياس المعقدات أي سنعاير بال EDTA بوجود مشعر أسود الأيروكروم.
🔷️ماء +مشعر >>>لون بنفسجي ناتج عن ارتباط الشوارد مع المشعر ثم سنعاير بال EDTA بالنسبة لقوة المعقدات :
EDTA-Ca>EDTA-Mg>Ind-Mg>Ind-Ca.
🔷️لذلك اول شي سيقوم ال EDTA بسحب شوارد الكالسيوم ثم سيسحب المغنزيوم و القطرة الأخيرة من ال EDTA يلي بتسحب كل المعادن و بتعاير بتخلي مشعر الأيروكروم يصير لحالو و لونو أزرق و القطرة التي تكون قبل نهاية المعايرة يكون لونها بنفسجي .
Note🔥:
مشعر الأيروكروم :
_لوحده : يعطي لون ازرق 💙.
_من بعيد :يظهر لون أسود🖤 .
_مع المعادن :يعطي لون توتي💜 .
🔷️معايرة الماء القاسي هي معايرة حجمية لقياس المعقدات بوجود EDTA و باستخدام مشعر الايروكروم .
🔷️أثناء عملنا حنضيف وقاء PH =10 (نشادر+كلور الأمونيوم)لأن في PH الحمضية تتشكل معقدات غير ثابتة بين EDTA و الشوارد إذا نحتاج PH قلوية لتشكل معقدات ثابتة لا تتفكك عند المعايرة .
طيب ليييش ما اخترنا ال PH اكبر من 10 لأنو وقتها حيترسب المغنزيوم على شكل هيدروكسيد المغنزيوم و عندها ما بكون قادرة أعير .
🔷️طريقة العمل :
10ml عينة ماء حاوية شوارد
1ml وقاء
قطرتين مشعر الأيروكروم ثم نقوم بتستيل ال EDTA 0.1 N حتى ظهور اللون الأزرق .
Note 🔥:
سنأخذ الفيول و نغسله بماء الحنفية الذي يحوي شوارد كالسيوم و مغنزيوم و بذلك سيعلق جزء منهم بالتالي يعطينا نتيجة خاطئة لذلك نتجنب الغسيل بماؤ الحنفية و نلجأ للغسيل بالماء المقطر.
🔷️يعبر عن القساوة بال ppm يعني mgكربونات الCa في 1L من الماء .
في وحدة تانية هي الدرجة الفرنسية يلي بتعادل 10mg من فحمات الكالسيوم في 1L ماء .
🔷️الحدود المسموحة مقدرة بال ppm :
_للاستهلاك البشري 30 في حال زاد عن 30 فالماء موذي و لا يجب شربه و سيتم استخدامه التنظيف اما اذا كان اكبر من 100 يعني رديء و لا يستخدم حتى بالجلي و التنظيف .
🔷️مياه الفيجة تحوي 14 الى 16 ppm .
🔷️المياه الغازية تحوي 6 ppm .
🌸الحسابات كل 1مل من ال EDTA تعاير 1مل شوارد لذلك كل nالمصروف EDTA تعاير x شوارد و بعدين  منضرب الناتج ب 100 ليطلع بال ppm و اذا بدنا بالوحدة الفرنسية منقسم على 10 .
آخر شي حنحكي عنو هوي الكشف عن الشوارد بالماء ( حنخلص ما تعصبو 🥺):
🌸النشادر :وجوده يدل على تلوث بالمواد العضوية و نكشف عنه بكاشف نسلر ( رابع يود الزئبق و البوتاسيوم )بيعطي لون برتقالي 🟠.
🌸النتريت :وجوده يدل على تلوث جرثومي نكشف عنه بتفاعل لوني ديأزة حيث سنحتاج كاشف زامبيلي (احفظوه من كلمة زومبي ☠)
هاد الكاشف بيحتوي أكين عطري اولي هو حمض السولفيناميك و الفينول يلي لح يتكاثف مع ملح الديآزونيوم و وسط حمضي )بيعطي لون أصفر 🟡.
🌸النترات :وجودها طبيعي ضمن حدود و تأتي من التربة .
نكشف عنها بكاشف كارون راكيه (حمض الصفصاف مع صفصفات الصوديوم ).
هذا التفاعل ضمن جفنة منحط 2مل عينة و 2 مل كاشف و نبخر على حمام مائي بعدين منحط حمض كبريت كثيف 3قطرات و بعدين 2مل ماء مقطر و 5 مل نشادر قام شو بيطلع لون أصفر 🟡يلي هوي بارا نتو صفصفات الصوديوم .
🔷️هلأ شغلة لما ضفنا حمض الكبريت تشكل سلفو صفصفات الصوديوم بالموقع بارا و بوجود  النترات بيصير استبدال بهذا الموقع ليعيطي بارا نترو صفصات الصوديوم .
و هيك منكون خلصنا رحلتنا بهي المادة 💜🔥
انشالله تكون المحاضرات كافية وحلوة💜
ادعولنا 💜🥺
بالتوفيق من ايليت 💜😍

#كيمياء_الأغذية
#الجلسة_التاسعة

هاي مع محاضرتنا الأخيرة🔥🥺 من مادتنا المحبوبة كيميا الأغذية
جلستنا اليوم بجلستين
أولا:معايرة الغلوكوز و السكروز :
🔷️ الغلوكوز سكر مرجع متل ما منعرف و السكروز مانو مرجع بس اذا تحلمه الى غلوكوز و فركتوز لح يكون مرجع و هوي سكر منقلب لأن كان يحرف الضوء المستقطب نحو اليمين لما تحلمه صار يحرف الضوء نحو اليسار ( قدرة الفركتوز انو يحرف الضوء نحو اليسار اكتر من قدرة الغلوكوز انو يحرف نحو اليمين ).
هلأ لما عايرنا الغلوكوز لوحده حطينا الرشاحة بالستالة و بالفيول  5 فهلنغA و 5 فهلنغB و 2.5 فروسيانور البوتاسيوم و نستل حتى ظهور اللون الأسمر و كان القانون 0.025 هي الكمية اللازمة لتحويل اللون من الازرق للاسمر و منقسمها ع المصروف n و منضرب الناتج ب 1000لحتى يصير بالليتر و بعدها منضرب ب 0.82 (عامل تصحيح يعبر عن القدرة الارجاعية لفرو سيانور البوتاسيوم ).
🔷️معايرة السكروز : نقوم بحلمهة حامضية حيث نأخذ 10 ml و نمدد ل 50ml بحمض كلور الماء و نضعه على حمام مائي لتتم الحلمهة و نعايرة متل العادة فهلنغ A و فهلنغ B و فروسيانور و هييك حتى يصير اللون الاسمر صار اسمر (و آه يا اسمر اللون آه يا اسمراني 😂🎶)و منعوض بالقانون 0.025 منضربها بعامل التصحيح 0.82 و ب 50 للعودة الى كامل الرشاحة و بعدها ب 100 للعودة الى الليتر و هيك أمورنا بالسليم
بس لسا فكرة أنو السكروز وزنه الجزيئي 342 و الفركتوز 180 و الغلوكوز 180 يعني 360 طبعا في جزيئة بتغادر لما يرتبط الغبوكوز مع الفركتوز و يشكله السكروز هي لازم ما نحسبها لأنو غادرت ففي عنا عامل تصحيح (طبعا عطول عنا عوامل تصحيح 🔥😁)يلي هوي 342/360 بيطلع 0.95 منضربها بالقانون .
🔷️نستخدم هذه الطرائق لمعرفة السكر في العسل و أيضا معرفة غش العسل يا عسل 🍯.
🔷️طبعا هيي محاضرة حجمية و تعتمد على القدرة الارجاعية للسكاكر .
🔷️يجب حفظ الحساب و معرفة كل رقم ع شو بيدل .

#سموم_شرعي
#الجلسة_السابعة

السلام عليكم للزملاء الأكابر 🤍
عسى تكونوا بخير جميعاً 🤍
المرة الأخيرة يلي حننشر فيها عن السموم الشرعي 🤍

سمية الباراسيتامول :
📌الاسم العلمي: أسيتامينوفين
📌حالة سريريّة: شابة بعمر ال١٦ سنة راجعت الاسعاف بعد 3 ساعات من تناول 26 حبة باراسيتامول عيار 500ملغ +اقياءات بآخر نصف ساعة
📌الفحص السريري:
_الحرارة :37° طبيعي
_معدل التنفس : 16 كمان طبيعي
_ضربات القلب : 80 برضو طبيعي
_الضغط : 110/60 فهو منخفض
_فحص الصدر والبطن : طبيعي
📍في عنا فحص اضافي ممكن نعملو هو فحص غلاسيكو
شو هو هالفحص؟ هالفحص بنستخدموا لتقييم مستوى الوعي وبالتالي تقييم صحة الجعاز العصبي المركزي عن طريق 3أمور :
1) العين
2) الكلام
3) الحركة
_بحيث نعطي تقييم رقمي من1 لـ 6
_مثلا هل عم يتحرك بشكل طبيعي ؟ وهون عطينا المريض تقييم 3
_هل المريضة عم تتحرك بمنبهات خارجية؟ ولنفرض عطينا كمان 3
_هل عم تتحرك بمنبهات ألمية ؟ وكمان عطينا 3
_مجموع التقييمات السابقة يلي حتكون ضمن المجال من 1لـ 15 حسب الآتي
1) المجموع كان تحت الـ8: المريض بكون فايت بغيبوبة وعالأغلب متوفي
2) بين 9_13 : حالة معتدلة
3) بين 13_15 :المريض سليم ووعيه تمام التمام
_طبعا بعد الجمع لمريضتنا طلعوا 9 ف وعيها معتدل
❓هل هالأعراض تشخص سمية الباراسيتامول؟
لا .. كلهن ضمن الحدود تقريباّ
📌شو الاجراءات ؟
❓فينا نعمل غسيل معدة؟
_قال لا .. اولاً صرلا 3 ساعات سافّة الدوا 😅، ف انتهت المعدة منو ،تانياً غسيل المعدة ليس الاجراء الشائع في التسمم بالباراسيتامول
_فينا نعمل إجرائين:
1) إعطاء فحم فعّال :فعاليته حتكون خلال ساعة لساعتين، وحيكون له وظيفتين : أ) ادمصاص الكمية الكبيرة من الباراسيتامول، پ) يبطئ الحركة الحويّة لحتى مايصير استقلاب للباراسيتامول
2) إعطاء N_أسيتيل سيستئين (NAC) يلي هو antidote للتسمم بالباراسيتامول
❓دائما بنعطيه؟ او له شروط للإعطاء؟
_الNAC له شروط للاعطاء حسب مخطط Rumack_mathew Nomogram
_هاد المخطط بيعطينا خط مستقيم بيقيس تراكيز الباراسيتامول خلال ساعات الاعطاء ، تبدأمن 4 ثم8 وحتى24 ساعة
_فإذا كان التركيز بعد4 ساعات تحت 150ug/ml هون مابنستخدم الNAC، والعلاج بكون معالجة للأعراض فقط مثلا ان كان في اقياء بنعطي مضاد لإله.
_إذا كان التركيز فوق ال150ug/ml هون ضروري نعطي الNAC فموياً أو وريدياً بجرعة هجومية بالبداية
🔴بحالة المريضة عنا طلع التركيز 224ug/ml بالتالي بنقدر نعطي الNAC
📍 فموياً: بجرعة هجومية 140mgلكل KG (يعني ان المريضة وزنها 60 ف الجرعة حتكون 60×140) وبعدها بنعطي 70mg كل 4ساعات
_مع ملاحظة: الطريق الفموي له سلبية يلي هي: اذا كان المريض عم يتقيأ فمارح يستفيد شي بهالحالة ، بنقدر هون نعطيه مضاد اقياء وننطر ليوقف الاقياء وبعدا نعطيه الNAC فموياً
📍وريدياً : بجرعة هجومية150mgلكل KG وبعدها 125mg كل 4ساعات
_مع ملاحظة : الطريق الوريدي له سلبية : يلي هية ممكن المريض يتحسس أو المادة تسببله تخريش

❓شو آلية عمله للـ NAC؟
_بشكل عادي لما بناخد حبة السيتامول حينتج عن الاستقلاب مركب اسمو NAPQI وهاد المركب سام وبيولّد جذور حرّة لكن كميته قليلة ،فـ الغلوتاتيون يلي بالجسم بيقدر يخلصني من هالكمية الصغيرة
_أما بحالة المريضة عنا، في عنا تراكيز عالية من هالمستَقلَب، والغلوتاتيون صار غير قادر على التخلص من هالكمية كلها، لهيك بدي مصدر خارجي يخلي الغلوتاتيون يتصنع اكتر لحتى يتخلصلنا من هالمركب يلي مسبب السمية وهالمصدر الخارجي هو NAC( فيو سيستئين بيدخل بتركيب الغلوتاتيون)

📌هل يمكن إعطاء الفحم الفعال مع الـ NAC معاً؟
_نظريّاً : لا لانه الفحم ممكن يدمص الـNAC
_عمليّاً : عم ينعطى فحم فعال وبعده ينعطى الNAC لأنو التركيز عم يطلع فوق ال150ug/ml
_وبنفس الوقت بنكون عم نحمي الكبد من التراكيز العالية من الNAC

🔴لإيمتا بنقدر نعطي الAntidote وبنفس الوقت نضمن حماية للكبد؟
_قال لمدة 8ساعات قادر الكبد انه يتخلص منه بدون ما يصير سمّية كبدية ..

انتهت 🤍
بالنهاية بنقول يارب نكون فدناكن ولو بشي يسير بهالمادة هالفصل🤍
سامحونا إن قصرنا أو غلطنا 🤍
وربي يجعل النجاح حليفنا جميعاً 🤍
ماتنسوا تدعولنا وإلكن بالمثل إذا الله راد 🤍
من إيلييت بنتمنالكن كل التوفييق 🤍
#elite_pharmacy🤍

💥عندما نقوم بتفاعل PCR  إذا ظهرت نواتج سلبية أول أمر نشك به هو نقص شوارد المغنزيوم و الأمر الثاني يكون خطأ بالبريمرات و ذلك لأهمية شوارد المغنزيوم في التفاعل لأنها تميم أنزيمي للبوليميراز ليعمل بثبات

💥ترتيب المواد الداخلة بالتفاعل :
الماء
برايمرات
ماستر ميكس
العينة
نمزج بحرارة منخفضة
ثم نرفع درجة الحرارة ليبدأ التفاعل

⭕فوائد PCR :
الكشف عن الأمراض خصوصاً الأمراض الفيروسية
الكشف عن الجرائم
كشف و إثبات النسب
دراسة الجينات
الكشف عن الطفرات

⭕البرايمرات :
طول البرايمر يؤثر على عدة عوامل إذا ازداد طوله تزداد  نوعيته و استهدافه لجين معين
طول البرايمر ممكن ان يؤثر أيضاً على حرارة الالتصاق كل ما زاد الطول زادت الحرارة
و يتعلق بمحتوى البرايمر من نكليوتيدات C/G
لأن الرابط بينهم ثلاث روابط هيدروجينية فتحتاج حرارة عالية للفك فيجب أن يكونوا بنسب ثابتة من 40 ل 60 ٪ و ليس أكثر لأنه مع زيادة النسبة سنحتاج لحرارة أعلى ستؤدي لتخريب التفاعل

⭕تداخلات البرايمرات:
ستتداخل عند وجود سوء بالتصنيع أو لم يتم صف النكليوتيدات بشكل مدروس

⭕أنواع التداخلات :
_تداخل F_F أو R_R عندها نسميه self dimer
_ أو R_F. اسمه primer dimer

_نوع Hair pin هو أن يلتف البرايمر حول نفسه و يشكل بنى ثانوية
_تسلسلات البرايمر المتسلسلة أي مثلاً AAAA
_ و يجب مراعاة تسلسل البرايمر الأول مثلاً بدايته AC فالبرايمر الثاني لايجب أن يكون متممه TG
جميع هذه الحالات مرفوضة
🔥أطراف البرايمرات يجب أن تحتوي على نكليوتيدات CG لانها تشكل روابط قوية مع الدنا
🔥درجة الانصهار:
هي حالة انتقالية يكون فيها نصف الدنا ثنائي الطاق و النص الآخر أحادي الطاق نحصل عليها من العلاقة
Tm = 2ْc (A+T) + 4ْc ( C+G )

🔥 درجة الالتصاق:
هي الدرجة التي يلتصق بها البرايمر مع الدنا
Ta = Tm- 5ْc

💭يجب على البرايمر F و R التشابه بدرجة الانصهار و الالتصاق أو الفرق بينهم خمس درجات و ليس أكثر ؟!
لأن عند وجود الفارق بينهم لا نستطيع ضبط الحرارة عند كل مرحلة و يتلصق البرايمر على طاق و الآخر لا يلتصق


💥 إذا عنا جينة بدنا نصمم برايمرات الها
سؤال فحص 💥
لدينا الطاق الآتي
5ٰ ACCTGA......ATCGTA 3ٰ
حدد البرايمر F و R :
ننظر للطاق إذا كان اتجاهه من 5» 3
فال F هو نفسه بداية الجين
{5ٰ ACCTGA 3ٰ }
أما R هو المتمم لنهاية الجين
{ 5ٰ TAGCAT 3ٰ }

💥ملاحظ أن بداية البرايمر يجب أن تكون دائماً من 5ٰ » 3ٰ

أما اذا عكسولنا الاتجاه و عطونا الطاق المقابل

3ٰ TGGACT......TAGCAT 5ٰ
 
فالF هو متمم البداية
و الR هو نفس النهاية

و أخيراً من فريق إيليت نتمنى لكم التوفيق 🙏💙💙💙💙💙💙💙💙

⭕الذي يميز تفاعل ال pcr  النوعية و الفعالية :
النوعية استهدف تسلسل نكليوتيدي محدد و لا يوجد اي تلوث ولا شوائب
الفعالية استهداف كمية الدنا بأكبر قدر ممكن لا مشكلة لوجود تلوث

🔥متى نحتاج إلى فعالية و متى إلى نوعية ؟!
نحتاج النوعية عندما نكشف عن أمراض حساسة فيروس HIV سنستهدف الجين المحدد الذي يشخص إصابة المريض بالفيروس لا يوجد مجال للخطأ بالتسلسل النكليوتيدي .
أما المريض المشخص سابقاً بمرض مثلاً التهاب الكبد نعلم عن إصابته بالمرض و لكن نريد أن نعلم نسية إصابته بالمرض أو نسبة جينوم الفيروس فنستهدف الفعالية

⭕زمن التمسخ البدئي :
فقط بأول دورة من PCR لأن الدنا يكون ثنائي الطاق مرتبط مع بعضه البعض بشكل كامل و بالتالي نحتاج لوقت أطول لنفكه و تظهر الجين المستهدفة بالدنا أحادي الطاق
وقت تمسيخ الدنا بكل دورة ٣٠ ثانية
لبنما أول دورة ٢ لل ٣ دقائق

⭕زمن الاستطالة النهائي :
يتم في آخر دورة من دورات PCR لأن أنزيم البوليميراز في نهاية التفاعل يكون قد استهلك بشكل كامل و بم يعد يعمل بكفاءة عالية فنعطيه وقت زائد لكي يرمم الأخطاء التي حدثت .

⭕المواد الداخلة بالتفاعل :
1.نكليوتيدات
2. Taq polymerase
3.شوارد المغنزيوم و البوتاسيوم بشكل أملاح

هذه المواد تتواجد بشكل جاهز KIT يدعى
master mix
يكون دائماً بتركيز 2X نمدده إلى 1X

4.يدخل أيضاً بالتفاعل البرايمرات بنوعين F و R بتركيز 0.5 ميكرو مول

5.عينة دنا تكون بتركيز 0.1 » 10 نانو غرام بالميكرو لتر

6.ماء ثنائي التقطير منزوع الشوارد و منزوع النكلياز نتم به إلى الحجم إلى الحجم النهائي الذي يشار إليه بنص المسألة

🔥فكيف نحسب الحجوم ؟! موجودين بالصورة

#بيولوجيا_عملي
#الجلسة_السابعة

🔴PCR
تفاعل أنزيمي يتم بفعل أنزيم البوليميراز هو عبارة عن عدة مراحل من التفاعلات يتم ب من 20 »30 دورة ، يشبه عملية تضاعف الدنا داخل جسم الإنسان حيث من جزيئة دنا نحصل على جزيئتي دنا لكن الفرق أن تفاعل ال PCR لا يتوقف عند جزيئتي دنا و إنما يستمر  ، و يشبه عملية الانتساخ حيث تفاعل PCR يستهدف جينه محددة على الدنا .
إذاً هو تفاعل تضخيم يجري على ال DNA .

⭕مراحل ال PCR : 
1.تمسيخ الدنا Denaturation :
لدينا دنا ثنائي الطاق يتصل ببعضه بروابط هيدروجينية ، نباعد بين الطاقين عن طريق رفع درجة الحرارة إلى 95 درجة مئوية
( أما داخل جسم الإنسان تتم عبر أنزيم الهيليكاز )

2.إلصاق  البوادئ / ارتباط المشرع
primer annealing :
البوادئ عبارة عن تتاليات نكليوتيدية من ١٨ » ٢٢ نكليوتيد ، نصممها بحيث تتصل مع نهاية الجين المستهدفة ، اسم هذه البوادئ Forward primer لأنها تعمل بالاتجاه من 5ٰ»» 3ٰ و تلصق على النهاية 3ٰ ،
أما Reverse primer يلصق على النهاية 3ٰ و يتجه بالاتجاه المعاكس
نخفض درجة الحرارة إلى 55 » 62

3. مرحلة الإطالة extension :
بهذه المرحلة أنزيمات البوليميراز ترتبط على طرف البرايمر لأن شروط الأنزيم أن يكون هناك نهاية كربوكسيلية حرة عند 3ٰ حتى يبدأ بإضافة النكليوتيدات المتتامة
دائماً اتجاه البوليميراز من 3ٰ »» 5ٰ
هنا نرفع الحرارة إلى 72

◽تقلبات درجة الحرارة هذه يؤمنها المدور الحراري و هو حجرات معدنية تكسب و تخسر الحرارة بسرعة

◽عدد نسخ الدنا = 2 أس n
حيث n هي عدد الدورات

🔥عندما خفضنا درجة الحرارة من 95 إلى 55 ارتبطت المشارع لماذا لم يرتبط طاقي الدنا ؟!
بسبب الارتباط التنافسي الذي يتعلق ب
1. تركيز البرايمرات عالي لها الأفضلية للارتباط بالجين المستهدفة
2.طول البرايمرات ٢٢ نكليوتيد بينما طول الجين ١٠٠٠ نكليوتيد

🔥لماذا أنزيم البوليميراز لم يتخرب عند رفع درجة الحرارة إلى 72 ؟!!
لأنه أنزيم خاص taq polymerase مستخلص من الجراثيم في الينابيع الحارة فيتحمل درجات الحرارة العالية لذلك يمكننا إضافته من بداية التفاعلات و لا يتخرب أبداً

ارتباط البوليميراز مع البرايمرات سيتم بوجود شوارد المغنزيوم و البوتاسيوم ستعمل ك تمائم أنزيمية ستساعده بعمله على استطالة الدنا

🔥عندما رفعنا درجة الحرارة إلى 72 لماذا لم تنفصل البرايمرات عن الدنا ؟!
لأن أنزيم البوليميراز ارتبط على البرايمر عند النهاية 3ٰ و بدء بعمله مع الشوارد .

◽تختلف خصائص أنزيمات البوليميراز عن بعضها :
1.الثباتية بالحرارة مثلاً
taq polymerase ثابت بدرجات الحرارة
أما البوليميراز الموجود بالجسم يعمل عند درجة الحرارة 37
2.الفعالية :
taq
تكون فعاليته ضعيفة عند درجة الحرارة 55
أما عند درجة 62 تكون فعاليته بالحدود العليا
3.الركازة :
DNA polymerase
يعمل على دنا و يعطي دنا
RNA polymerase
يعمل على دنا و يعطي رنا
Reverse transcriptase
يعمل على رنا و يعطي دنا يعمل على جينوم الفيروسات
4.بعض أنزيمات البوليميراز تعمل على تصحيح الأخطاء

⭕ماذا يحتاج أنزيم البوليميراز إلى:
نكليوتيدات منقوصة الأكسجين
شوارد معدنية مغنزيوم و بوتاسيوم تمائم أنزيمية
◽يصل عدد دورات PCR إلى 30 دورة
لماذا لم نقلل الدورات إلى دورتين مثلاً ؟!
بالدورات القليلة لا يصبح عدد الجين كافي  للكشف عنه
و لم نرفع عن 30 دورة لأن المواد الداخلة من نكليوتيدات و أنزيمات و شوارد تكون قد استهلكت و المردود قل

⭕أطوار ال PCR :
_الطور البدئي E :
محصور بعدد دورات من 0 إلى 8 دورات
تركيز الدنا مرتفع و يثبت
كمية المواد الداخلة للتفاعل بتراكيز عالية
و الدنا بدأ يظهر

_الطور الوسطي M :
عدد دورات من 8 إلى 30 دورة
يستمر الدنا بالتضاعف و زيادة الكمية و يفضل بنهاية الدورات أن نوقف تفاعل PCR لأنه عند الدورة 30 ستنفذ الكميات و يصبح التفاعل غير مجدٍ .

_الطور المتأخر :
نوقف التفاعل

_الضغط كان 110/60 فهو منخفض نتيجة للاقياءات يلي سببت نقص بالشوارد وادت لانخفاضه
_الاسبرين يعبر الحاجز الدماغي الدموي .. لهيك بنخاف يكون في اذيات عصبية او التهاب سحايا ، بالفحص تبيّن انو الرقبة ليّنة » لايوجد أذية عصبية
📍بالحديث عن معدل التنفس :
_معدل التنفس مرتفع، بالتالي في اطراح لـ Co2 كتير، هالشي يؤدي للقلاء التنفسي ..
_يحاول الجسم المعاوضة من خلال الكلية، فتحتفظ الكلية بشوارد H وتطرح شوارد البوتاسيوم والبيكربونات وهالشي يؤدي للحماض الاستقلابي
🔴الاجراءات والعلاجات اللازمة فور وصول المريضة :
_مابنقدر نعمل غسيل معدة، ليش؟ الاسبرين حمضي وبهالعملية حيعمل تخريش
1)_ نعطي فحم فعّال
2)_ نعطي مضاد إقياء : أي مضاد إقياء عدا الميتوكلوبراميد،
ليش؟ الميتوكلوبراميد يعبر الحاجز الدماغي وممكن يسبب اذيات عصبية .. لهيك انسب حل هو الاوندانستيرون.
3)_ نعالج الحرارة بالكمادات، ليش مابعطي سيتامول ؟
اول شي الحرارة ماكتير عالية + في شي اهم التفت لإلو متل نقص الشوارد +لقدام حيبيّن معنا انو الدوا عبارة عن اسبرين +سيتامول
4)_ حيكون في نقص سكر لهيك بعاوض بمحلول سكري حاوي على شوارد K، ليش k؟ لانو هام للعضلة القلبية
❓ليش حيكون في نقص سكر ؟
الساليسيلات تثبط حلقة كريبس:
أ) »انخفاض السكر وبتتجه الخلايا لعملية التنفس اللاهوائي »لاكتات وبيروفات»حماض استقلابي
پ)»انخفاض في الـATP»تفكك الغليكوجين »زيادة استهلاك في السكر »حرارة سطحية
5)_الاسبرين قلنا طبيعته حمضية، والتسمم صاير بكمية كبيرة، واطراح الاسبرين كلوي» لازم نسرّع الاطراح، لهيك بنقلون بالبيكربونات ، 💥وهون بنكون ضربنا 3 عصافير بحجر واحد، ليش؟
اولاً: الكلية كانت عم تطرح البيكربونات وهيك نحن عاوضنا البيكربونات
تانياً: زدنا اطراح الاسبرين
تالتاً: قللنا من الحماض الاستقلابي
_بنعطيها ياه تسريب بجرعة هجومية، ثم يُعطى لفترة حتى يصل
الدم والبول (PH)= 7.5 وهيك بنحافظ ع معدل اطراح للاسبرين من1_2 ml لكل Kg بكل ساعة
📌الفحوصات اللازمة الاساسية:
1) معايرة الاسبرين بالدم : النتيجة كانت64mg/dl
2) معايرة شوارد الK.
3) معايرة Co2
📌الفحوصات الثانوية أو الإضافية:
1) خمائر الكبد : طبعا حتكون مرتفعة
2) الكرياتينين واليوريا : كون اطراح الاسبرين كلوي، فلحتى نتطمن على وظيفة الكلية
3) معايرة سكر الدم : متل ماحكينا فوق لانو حيصير عنا انخفاض سكر
4) معايرة السيتامول طلعت النتيجة 10mg/dl،
شو دخل السيتامول؟
اغلب أدوية الاسبرين بتكون بمشاركة مع السيتامول،
وطالما في نسبة للسيتامول ف في مشاركة، وهون النتيجة مانها سمّيّة، لهيك مارح نعطي اهمية للسيتامول
🌟الاسبرين ممكن يكون سريع او مديد التحرر
_سريع التحرر حيبلش التحرر اول مايبدأ الاستقلاب فورا
_مديد التحرر حياخد وقت أطول وحيعمل تكدّس، ولحتى نتخلص من التكدس وماينتج اعراض وتتعرض المريضة لحالة نَكس بعدها:
_ بنعمل شطف للامعاء بالبولي ايتيلن غليكول ..
❓ ليش هي المادة؟ لانها غير ممتصّة من قِبل الأمعاء
آخر اجراء هو :
5)التحال الدموي :
نستطيع اجراء التحال الدموي لكن بشروط
1) إذا كانت الحالة حادة يجب أن يكون تركيز الأسبرين 110mg/dl
_وهون مابنعمل تحال دموي لانو التركيز عنا 64mg/dl
2) إذا كانت الحالة مزمنة يجب أن يكون تركيز الأسبرين mg/dl40_60
3) المريض غير واعي
🔴هل نستطيع اجراء التحال الدموي للأطفال؟
أول اجراء بنعمله للأطفال في حال التسمم بالاسبرين هو التحال الدموي لان الاسبرين عند الاطفال يمكن ان يسبب متلازمة راي
_التحال يعني تغيير الدم😅

💫آخرررر فككككرة
📍Wintegreen زيت :
_عبارة عن سالسيلات المتيل
_يُستخدم بالازمات الرئوية أو التنفسية كموسّع للقصبات
_استخدامه خارجي فقط
_سام بشكل كبير حيث :
كل 5mlمنه(معلقة صغيرة)=7g ساليسيلات=21 حبة اسبرين ، يعني اذا صار سمّية بسببه، نعامله معاملة الاسبرين
_له رائحة محببة لهيك ممكن يجذب الأطفال ويسبب سمية

انتهينا 🤍
من ايليت بنتمنالكن كل التوووفيق 🤍
/ادعولنا🥺🤍/
#elite_pharmacy

#سموم_شرعي
#الجلسة_السادسة

السلام عليكم 🤍
تأخرنا عليكن سامحونا 🤍
_,الجلسة ماقبل الأخيرة 🥺
_الجلسة بجلستين .. حنحكي عن التسمم بالكوكائين والأسبرين
التسمم بالكوكائين :
📌الكوكائين :
_منشط للجهاز العصبي
_مقبض للأوعية الدموية
📌مستقلباته:
1) البنزوئيل ايغوانين BE
2)ايغوانين متيل استر EME
❓شو بيختلفوا المستَقلَبين عن بعضهن؟
_البنزوئيل ايغوانين لايحتاج لأنزيم ليظهر (لهيك ممكن لاقي الكوكائين خارج الجسم متحلمه وعاطي الBE)
_اما الـ ايغوانين متيل استر يحتاج لأنزيم ليظهر(هاد مابلاقيه إلا داخل الجسم .. لانو أنزيمه بالجسم)
🔴حالة سريريّة(طبعا من برّا البلد☺️) : وُجد طفل عمره 6 أسابيع متوفي بجانب والدته ..
_المعطيات يلي معنا : الأم متوفية بسبب جرعة عالية من الكوكائين
_المطلوب : معرفة سبب وفاة الطفل ..
*أول شي حنعمله هو اختبار لوجود الكوكائين والكحول عند الطفل ..
❓هلأ الأم متعاطية للكوكائين ولازم نعمل اختبار لإله فهمناها .. الكحول ليش؟
_قال في بلاد الفرنجة😅 يمكن أن يترافق تعاطي المخدرات مع الكحول سوا 🌚
_الجثة مرق وقت عليها لهيك مارح ناخد عينة دم ..
_بنقدر ناخد عينات من : محتوى المعدة/ خلط زجاجي/ سائل نخاعي شوكي/ كبد / عضلات/كلية
+ عينة من زجاجة حليب الطفل
+ عينة من العقي ..
❓شو هو العقي؟ أول براز للطفل بكون مُحتَفَظ فيه بالمستشفى .. وهاد العقي ببلش الجنين يحتفظ فيه وهو بعمر ال٢٠ أسبوع يعني تقريباً بالشهر الخامس من الحمل .. وهيك بنقدر نعرف من خلاله أي شي كانت الام الحامل تاخده خلال فترة الحمل (أدوية .. تعاطي كحول .. تعاطي مخدرات)
📍أخدنا عينة من محتوى المعدة وكانت النتائج بل ug/mlكالتالي:
_نسبة الكوكائين : 0.244
_نسبة الـ (BE): 0.088
_نسبة الـ (EME) : 0.092
📍أخدنا عينة من زجاجة الحليب وكانت النتائج بل ug/ml كالتالي:
_نسبة الكوكائين: 0.031
_نسبة الـ (BE): 0.004
_نسبة الـ (EME) : لا يوجد(خارج الجسم»مافي انزيم)
📍عينة العقي :
_كانت النتائج كلها ايجابية ( دليل وجود الكوكائين ومستقلَباته)

📍أخدنا عينة عضلات وعايرنا الكحول والأسيتون وكانت النتائج كالتالي :
_معايرة الكحول أنزيمياً :(ADH): النتيجة :0.0mg/g(لايوجد)
_معايرة الكحول ب (GC): النتيجة: 0.2mg/g (غير مرتفعة)
_نسبة الاسيتون : 18.8mg/l (مرتفعة)
📍النتيجة :
_طالما العقي عطى إيجابية هالشي يدل إنو الأم كانت متعاطية حتى خلال الحمل ..
_الطفل يُعتبر متعاطي كالأم تماماً ..والنسبة عالية ..
بس النسبة هي لاتؤدي للوفاة ..
_نسبة الكحول قليلة جدا » مانها سبب الوفاة
_يعني الكوكائين والكحول ليس سبب الوفاة وشكراً 🤝
❓ليش الاسيتون مرتفع طيب؟؟؟
_الاسيتون كصيغة كيميائية هو كيتون ..والاجسام الكيتونية بتظهر بتلت احتمالات :
1) سكري: نتيجة لنقص الأنسولين وبالتالي الغلزكوز لساتو بالدم ومادخل عالخلايا»الخلايا ماقدرت تاخد طاقة من السكر »لجأ الجسم للدسم ليحصل ع طاقة »بسبب تحلل الدسم ارتفعت نسبة الاجسام الكيتونية
2) تعاطي الكحول : ونحن نفيناها قبل
3) حالة الجوع ..
_حنفصّل بحالة السكري :
نقيس نسبة الغلوكوز واللاكتات .. وطالما مابنقدر ناخد عينة دم .. حناخد عينة خلط زجاجي وعينة سائل نخاعي شوكي ..
❓ليش غلوكوز ولاكتات؟
لنعرف اذا الطفل معو سكري او لا
_نسبة الغلوكوز بالخلط الزجاجي : 50ug/ml
_نسبة اللاكتات بالخلط الزجاجي : 130ug/ml
_نسبة الغلوكوز بالسائل النخاعي : 60ug/ml
_نسبة اللاكتات بالسائل النخاعي :135ug/ml
📍ولحتى نعرف إن معو سكري أو لا ننطبق العلاقة :
تركيز الغلوكوز+١/٢تركيز اللاكتات (يا بالخلط يا بالسائل النخاعي)
_اذا كانت النسبة فوق ال410mg/dl فهو مصاب بالسكري وساعتها بتكون الوفاة بسبب غيبوبة سكري
_اذا النسبة أقل من410mg/dl فهو غير مصاب بالسكري ..
_الحسابات :
مثلا بالخلط الزجاجي : 50 +130/2 =115
» الطفل غير مصاب بالسكري» الوفاة ليست بسبب السكري ..
🔴طالما انتفت الوفاة بسبب الكحول والسكري رغم انو نسبة الاسيتون عالية ..
_اذاً الوفاة حصلت بسبب الجوع 🙃
انتهت جلسة الكوكائين 🤍
التسمم بالاسبرين :
📌الاسبرين: طبعا متل مابنعرف يستخدم كمسكن الم وخافض حرارة ومضاد لتكدس الصفيحات ..
🔴حالة سريرية :
فتاة بعمر الـ 12 سنة راجعت الاسعاف بعد3ساعات من تناول 26 حبة اسبرين، مع 4اقياءات
_تُعتبر حالة حادة وليست مزمنة 🤝
📍الفحص :
_الحرارة 37.7° (الطبيعي 37° لهيك مرتفعة شوي تُعتبر)
_معدل التنفس 30 (الطبيعي من16_24 فهو عالي)
_ضربات القلب 140بالدقيقة(ا لطبيعي70_80 فهو متسرع )
_بالاصغاء لأصوات الصدر في حال كان في وذمة : كانت الاصوات طبيعية

#الصيدلة_الصناعية_2_عملي
#الجلسة_الثامنة

السلام عليكم ورحمة الله وبركاته!
نصل الآن لآخر محطة من هذه المادة وعنوان الجلسة:
تحاميل الجيلاتين والغليسيرين

🔷 نبدأ بكتابة بعض القوانين
▫️ عامل الإزاحة:
f = M/S
f: عامل الإزاحة
M: الفرق بين وزن تحميلة السواغ ووزن السواغ في التحميلة الدوائية (الوزن المزاح)
S: وزن المادة الدوائية في التحميلة
▫️ كمية السواغ اللازم استخدامها:
كمية السواغ = E - f.S
E: عيار القالب
▫️ وإذا كان لدينا أكثر من مادة فعالة فإن القانون يكون
E - Σf.s
أي نجمع جداء عامل إزاحة كل مادة بكميتها.
ملاحظة: لا ننس التحويل والضرب بعدد التحاميل.

🔷 ذكرنا الأسس الدسمة نصف الصنعية، وذكرنا منها Witepsol ولهذه المادة أنواع عديدة تختلف بقرائن عدة: قرينة الهيدروكسيل، وقرينة اليود، وفاصل الانصهار، واللزوجة، ودرجة الانصهار.

▫️ قرينة اليود: تدل على عدد الروابط غير المشبعة، وكلما ارتفعت كان السواغ عرضة للتزنخ.
زبدة الكاكاو تحتوي على حموض غير مشبعة وبالتالي قرينة اليود عندها أعلى من السواغات نصف الصنعية.

▫️ قرينة الهيدروكسيل: تعبر عن عدد مجموعات الهيدروكسيل الموجودة في السواغ، فمثلا زبدة الكاكاو هي ثلاثي غليسيريد فستكون هذه القرينة منخفضة فيها، أما السواغات نصف الصنعية التي تكون أسترة الغليسيرول فيها جزئية (أحادية أو ثنائية) تكون القرينة فيها أعلى.
كلما كانت قرينة الهيدروكسيل أعلى كان المادة مرتبطة بالسوائل الموجودة بالمستقيم أكثر وبالتالي سيكون تحررها أبطأ وسيكون التأثير موضعي. والعكس إذا كانت القرينة منخفضة.

▫️ درجة الانصهار: كلما كانت أقل كان الذوبان أسرع وبالتالي توافر حيوي جهازي، وإذا كانت مرتفعة ستستغرق وقتا حتى تنصهر بدرجة حرارة الجسم.
ملاحظة: درجة الانصهار هي العامل الأهم بتحديد سرعة التحرر.

نذكر:
▫️ Witepsol E85, E75
وهذان النوعان يتمتعان بدرجة انصهار MP مرتفعة، وقرينة هيدروكسيل منخفضة.
▫️ Witepsol S51, S58
لديهما قرينة هيدروكسيل مرتفعة، ودرجة انصهار منخفضة.

⬜ وصفة تحاميل لعلاج البواسير:
فلو سينولون أسيتونيد 0.1mg
تحت عفصات البزموت 100mg
منتول 5mg
ليدوكائين (HCl) 40mg
سواغ مناسب حتى 3g
فلو سينيولون أسيتونيد هو كورتيكوستيروئيد مضاد للإلتهاب.
تحت عفصات البزموت مقبض للأوعية الدموية ومجفف.
منتول مبرد.
ليدوكائين مخدر.
والسواغ المناسب هو الذي له درجة انصهار أعلى مثل ويتبسول E.

⬜ وصفة تحاميل مسكنة للألم
باراسيتامول 250mg
أسبيرين 250mg
سواغ مناسب حتى 3g
الباراسيتامول والأسبيرين مسكنان للألم، ونريد تأثير جهازي سريع، وإذا أردنا اختيار سواغ فالأنسب هو ويتبسول S.

🔷 أسس محبة للماء (منحلة بالماء) Hydrophilic (water-soluble) base:
▫️ بولي إيثيلين غليكول PEG: بالمراهم كانت النسبة الأكبر للشكل السائل بالبولي إيتيلين غليكول، أما بالتحاميل فلأنها شكل صلب فستكون النسبة الأكبر للشكل الصلب.

▫️ مزيج من الغليسيرين والجيلاتين Glycero-gelatin base:
ميزاتها: تنحل في الجسم فلا نهتم لدرجة الانصهار.
لا نعاني من مشكلة تعدد الشكل البلوري.
مساوئها: أنها شرهة للماء لذلك هي مخرشة للمستقيم.
عرضة للنمو الجرثومي ولذلك نحن بحاجة لمواد حافظة.

⬜ صيغة تحاميل الغليسيرين (ملينة)
جيلاتين 1g
غليسيرين 6g
ماء 3g
الجيلاتين يشكل قوام التحميلة الهلامي، والغليسيرين يعطي التأثير الملين.
طريقة التحضير: نوزن الكميات، ونضع نصف كمية الماء مع كمية الغليسيرين ونسخن وعندما تسخن نبدأ برش الجيلاتين على المزيج مع التحريك كي لا يتكتل ولا نحرك بقوة لكي لا يتشكل فقاعات عندما ينحل الجيلاتين بالوسط نرفع عن الحمام المائي ونضيف كمية الماء المتبقية ونحرك ثم نصب في القوالب بعد التزييت ولا نضيف كمية فائضة لأن التحاميل لن تنكمش (+ لا يمكن إزالة الفائض لأن القوام مطاطي وستتشوه التحميلة)، ونترك التحاميل لتبرد.

وبهذا نكون قد أنهينا مقرر العملي لمادة الصيدلة الصناعية ٢ وبها نختم عائلة الصيدلانيات، من إيليت نرجو لكم كل الخير.
والسلام عليكم ورحمة الله والحمد لله رب العالمين!

#بيولوجيا_عملي
#الجلسة_السادسة

🔴 الرحلان الكهربائي

◽المبدأ : طريقة فصل تعتمد على الوزن الجزيئي للمادة و شحنتها ، يفصل البروتينات/DNA/RNA ، عن طريق تطبيق تيار كهربائي لترحيل الجزيئات من قطب إلى قطب آخر .

مثلاً: كلما كانت الجزيئات أكثر سلبية و أصغر حجم كان الرحلان أسرع

🔥جزيئات كبيرة »» سرعة أقل »» مساحة أقل
🔥جزيئات صغيرة»» سرعة أكبر»» مساحة أكبر
_ماذا نستفيد من الرحلان ؟
رحلان الهيموغلوبين للكشف عن الطفرات المرضية مثل عند مرضى التلاسيميا أو فقر الدم المنجلي
بالنسبة للدنا نستخدمه قبل ال PCR بعد استخلاص الدنا من العينة نجري الرحلان فتظهر شدفة كبيرة تدلنا على وجود دنا
أما بعد ال PCR يدلنا الرحلان على وجود جينة معينة أو شدفة
إذاً الرحلان يتم إما قبل PCR  أو بعده
قبله للتأكد من وجود الدنا ، بعده للتأكد من الحصول على الجينة أو الشدفة المراد سلسلتها

⭕الطريقة :
الرحلان سوف يتم على هلامة إما الأغاروز أو البولي أكريل أميد
الفرق بين الهلامتين البولي أكريل قادر على ترحيل أحجام قليلة من الدنا بشكل واضح حتى لو كانت شدفة الدنا بفواصل صغيرة ١٠٠ نكليوتيد مثلاً فهي قادرة على تقسيمها
أما الأغاروز أقل شي ١٠٠ نكليوتيد (أي لازم أكثر)

البولي أكريل أميد مشكلتها غالية و سامة يجب التعامل معها بحذر
الأغاروز لا يوجد سمية و رخصية

⭕نأخذ 1 غرام أغاروز تركيزه ١٪ نحله بالوقاء إما TBE أو TEA
الTBE هو تريس بورات إيديتا (الأكثر استخداماً)
ال TEA هو تريس أسيتات إيديتا

🔥تركيز الأغاروز المستخدم بين ٠.٥ _ ٣ ٪ 
كل ما زاد تركيز الأغاروز المسامات ستكون صغيرة ضيقة
التركيز العالي ٣ ٪ يستخدم للدنا صغيرة الحجم عدد نكليوتيداتها قليل
بينما الدنا الذي يحوي ٢٠٠ لل ٣٠٠ bp كبيرة الحجم نستخدم هلامة الأغاروز تركيزها ٠.٥٪ لأن مساماتها ستكون واسعة
التي تم استخدامها تركيزها ١٪ لأن شدف الدنا كبيرة
💥 لزيادة قدرة الفصل نستخدم هلامة الأغاروز ذات تركيز عالي لأن المسامات صغيرة أو نستخدم هلامة البولي أكريل


⭕نأخذ غرام أغاروز نحله ١٠٠ مل وقاء و يتم تسخينه و نبرده للدرجة 50 و نضعه بقوالب

و بين الدرجة 40 لل 50 نضع صباغ الإيتيديوم بروميد بين طاقي الدنا لتتلون العينة و مجرد تعريضه لأشعة UV ستتألق شدف الدنا
*يمكن وضع الصباغ في البداية قبل الترحيل أو بالنهاية نضع الهلامو بالصباغ لمدة نصف ساعة ثم نعرضها لل UV

🔥لا نضعه بدرجة حرارة أعلى من 50 !
لأنه سيتطاير و يتخرب
🔥لا نضعه بدرجة حرارة أقل من 40 !
ستتصلب الهلامة يمنعه من التغلغل بالعينة
🔥الإيتيديوم بروميد مادة مطفره مسرطنه

⭕قبل تصلب الهلامة يجب تشكيل آبار عن طريق مشط فيه أسنان محل كل سن يترك بئر لنضع فيه العينة
⭕تحضير العينة المستخلصة :
نأخذ 10 ميكرولتر نضعها ضمن البير
🔥لكن العينة شفافة و الهلامة شفافة كيف نتأكد أننا وضعنا العينة ضمن البير ؟
نضع ملون
🔥عينة الدنا مائية نخاف أن تطفو و تندمج مع عينة الدنا بجانبها ؟
نضع مادة تثقل العينة
هي صباغ التحميل loading dye
هو عبارة عن مادة ملونة تدعى أزرق بروم الفينول مع غليسيرين

🔥يستعمل بتركيز 1/6
اذا عينتي 10 ميكرولتر نأخذ من الصبغة 2 ميكرولتر أصبح الحجم الكلي 12 فالصبغة تمددت 6 مرات
مثال آخر إذا عينتي 20 ميكرولتر نأخذ الصبغة 4 ميكرولتر لأنو الحجم النهائي 24
4×6= 24

⭕مع آبار العينات يوجد بيرين :
الأول شاهد إيجابي Ladder marker أحجام الدنا معروفة و التراكيز مختلفة و معروفة .
الشاهد السلبي جميع الكواشف المستخدمة عدا الدنا
من الشاهد السلبي بكشف اذا في عندي تلوث
من الشاهد الإيجابي بقارن مع العينات و بكشف تركيزها و حجمها

على ورقة نضع العينات و نضع صبغة التحميل و نمزجهم و نسحب العينة و نضعها بالبير

⭕قراءة النتائج :
الفولتاج بين 60 _ 120 v على حسب طول الهلامة كل 1 سم هلامة تحتاج 4 فولتاج لمدة ٣٠ دقيقة سترحل جزيئات الدنا من القطب السالب إلى القطب الموجب لأن الدنا سالب بسبب الفوسفات و الوقاء ساعد على عملية نقل التيار الكهربائي
نضع الهلامة على uv ستتألق العصابات نقارنها مع الشاهد الإيجابي سننظر ل ثلاث أمور :
_حجم العينة
_تركيز العينه
_شكل العينة
حجم العينة أي طولها كم bp أي كم زوج من النكليوتيدات
التركيز شدة التألق
الجدول بالصورة يبين رحلان  الشاهد الإيجابي و الشاهد السلبي و العينات
S1
شدة تألقها مثل التالتة لكن حجمها بين الاولى و التانية
S2
تألقها متل الأولى و حجمها متل الرابعة
S3
مقسومة إلى شدفتين حجمها مثل الأولى و تركيزها مثل الرابعة
قيم الحجم و التراكيز تكون معلومة.

💭إذاً الخطوات:
_تحضير الهلامة
_تشكيل الآبار
_نضع الإيتيديوم
_تحضير العينة مع الوقاء
_تحميل العينة بصباغ التحميل
_نحضر شاهد إيجابي و شاهد سلبي
_نطبق التيار و نحدد الزمن

ثانيا معايرة الكلور🔥:
معايرة ترسيب فولهارد
نضيف كمية فائضة من من نترات الفضة قسم سوف يتفاعل مع الكلور و يعطي راسب من كلويد الفضة و الفائض سوف يعاير بثيوسيانات البوتاسيوم بوجود مشعر شب الحديد النشادري عندها النقطر الفائضة من ثيوسيانات البوتاسيوم سوف تتفاعل مع المشعر و تعطي لون برتقالي (معايرة بالرجوع ).
🔷️نضيف حمض الآزوت لماذا؟
اولا لتأمين وسط حمضي لتشكل الراسب .
ثانيا لأن الوسط القلوي يؤدي إلى تشكل هيدروكسيد الفضة الذي يتحول إلى اكسد الفضة راسب اسود يعيق نتائج المعايرة لهيك حطينا حمض ازوت .
💊طريقة العمل :
🔷️50ml رشاحة
🔷️5ml نترات فضة
🔷️2ml حمض ازوت
🔷️2mlمشعر شب الحديد
و منعاير و نستدل على نهاية المعايرة بظهور اللون البرتقالي .
هلأ معايرة بالرجوع منطرح الكلي من مصروف الفائض بيطلع قديش تفاعل مع الكلور يعني 6.5 ناقص المصروف يلي هوي n بعدين منضرب بالميلي مكافئ لكلور الصوديوم لأنو نحنا عايرنا ابشكل الكلحي للكلور و هوي 0.00585 و بعدها منضرب ب2 مشان يصير التركيز ب 100ml كل الرشاحة و بعدها منضرب ب 10 ليصير التركيز بالغرام ع الليتر .
التسبة الطبيعية للكلور (1 إلى 2 ).
الحسابات بالصور ⬇️⬇️🔥
لهون بتكون خلصت محاضرتنا لليوم 🔥.
من ايليت كل التوفيق 💜

#كيمياء_الأغذية
#الجلسة_الثامنة

و منرجعلكن بمحاضرتنا التامنة من مادة كيميا الأغذية 🔥💊
معايرة اللاكتوز و الكلور في الحليب 🔥
عندما يكون اللاكتوز منخفض عن الحدود الطبيعية عندها يكون الحليب إما قديم (محمض ) أو ممدد(مغشوش) أو حالة مرضية (البقرة لديها الاهاب ضرع ).
التهاب الضرع يؤدي إلى انخفاض نسبة اللاكتوز و ارتفاع نسبة الكلور و هوي مضر لأنو بيكون مترافق مع جراثيم مرضية و ممكن الأدوية و المضارات الحيوية يلي بنعطيهن للبقرة تنطرح عن طريق الحليب لهيك هيدا الحلب مو صالح للشرب .
إذاً الفائدة من معايرة اللاكتوز و الكلور هي :
🌸 كشف غش الحليب .
🌸 كشف وجود التهاب ضرع عند البقرة.

💊أولاً نحنا لح نعاير اللاكتوز :
اللاكتوز سكر مرجع لذلك لح نعتمد طريقة فهلنغ يلي بتعطي راسب أحمر آجري (أكسيد النحاس) بس الطريقة يلي منستخمها هون هيي طريثة كوسبنك (فهلنغ المعدلة).
هلأ بمعايرتنا لح نسخن شو بيصير ؟
لح تتخثر البروتينات و تشكل عائق كيف حنتخلص منها ؟؟
لح نقوم بعملية تجريد كيف ؟
سوف نضيف فروسيانور البوتاسيوم 15%و خلات التوتياء او الزنك 30%.
💊خطوات العمل :
🔷️نأخذ 10ml حليب و نضيف 1ml فروسيانور البوتاسيوم و 1ml خلات الزنك أو التوتياء و نضعهم ببالون مهايرة سعته 100ml و نكمل بالماء المقطر لخط العيار .
🔷️نرشح للتخلص من البروتينات .
🔷️نأخذ 50ml من اارشاحة لمعايرة الطلور و الباقي نضعهم بالستالة من أجل معايرة اللاكتوز .
🔷️نضع بالفيول 5ml فهلنغA و 5ml فهلنغ B و 2.5ml فروسيانور البوتاسيوم 5% .
🔷️نعاير و يكون الفيول على السخان كي يتم التفاعل و نستدل على نهاية المعايرة عند تحول اللون إلى أسمر حيث يمر بعدة ألوان أزرق ثم أخضر ثم أصفر ثم أسمر (نهاية المعايرة ) .
💊تساؤلات:
_ما تركيب فهلنغA؟
كبريتات النحاس و هو المؤكسد.
_ما تركيب فهلنغB؟
طرطرات البوتاسيوم و الصوديوم (للحفاظ على النحاس بالشطل الشاردي ) و صود(لأن التفاعل يحتاج وسط قلوي ) .
_لماذا أضفنا فروسيانور البوتاسيوم5%؟
لأن المعايرة وزنية تعتمد على اكسيد النحاس المتشكل و نحن نريدها معايرة حجمية لذلك الفروسيانور سوف يحل أكسيد النحاس و يحول المعايرة من وزنية إلى حجمية .
و لكن الفرو سيانور له قدرة إرجاعية لذلك سوف يشارك بالتفاعل لإلغاء تأثيره نضرب  بعامل تصحيح.
_هلأ شو عمل كوسبنك ؟
حضر محلول من السكروز 5gبالليتر و نضعهم بالستالة و بالفيول نضع 10mlفهلنغA و 10ml فهلنغB و 5ml فروسيانور البوتاسيوم 5%و نعاير احتجنا 10ml من أجل السكروز نقسم الكميات على 2 و نحصل على التركيز ب5ml و نعتبرها العيارية بس في مشكلة هي التركيز للسكروز لذلك منضرب بعامل تصحيح الذي يعبر عن القدرة الارجاعية لللاكتوز بالنسبة للسكروز(1.46).
و منضرب بعامل تصحيح تاني يلي بيحذف تأثير الفروسيانور (0.82).
و منضرب ب100لأنو نحنا مددنا بالأول و منضرب ب 100 تانية ليصير التركيز بالليتر من الحليب عندها التركسز بيضير بالغرام على ليتر .
القيم الطبيعية هي (45 لل50 ) .
الحسابات بالصور ⬇️⬇️🔥.