رحلة طبيب المختبر

لا تقتلن أطفالكن ؛ هذه هي تشوهات الأنبوب العصبي بسبب نقص حمض الفوليك فعند التخطيط للحمل يجب تناول حمض الفوليك قبل الحمل بشهر و خلال الثلاثة أشهر الأولى من الحمل تجنبا لهذه المشكلة و هذه هي أهمية حمض الفوليك للحامل ❗

عينة مريض مصاب باللوكيميا ، انظروا لحجم الطبقة الوسطى ⬇️
ادعوا له بالشفاء

https://t.me/minersquad_bot?start=_tgr_ly0SiX83MzNk

Eggs of Enterobious Vermicularis

Aspergillus clavatus

entamoeba histolytica cyst
Giardia lamblia trophozoite under microscope

عينة Stool لطفل عمره 12سنه

* Triple phosphate Crystals

* له احجام مختلفه (صغير- وسط- كبير)

* يظهر في الوسط القاعدي

* اقرب تشبيه له (التابوت)

* عنده تجمع هذا الكرستال باعداد كبيرة راح يكون الحصى في الكلى.

* لازم تميزون بينه وبين الكالسيوم اوگزاليت
- الكالسيوم يحتوي بالوسط على علامة اكس
- التربل يحتوي بالوسط خط مستقيم ومن الجوانب مثلث أو شكل التابوت

* اسباب ظهور هذا الكرستال اصابات بكتيريه مثل
pseudomonas
Proteus mirabilis
Klebsiella
Staphylococcus

* دائما المريض الموجود عنده هذا الكرستال بكثره يلاحظ لديه:

ادرار غائم
رغبة بالتبول كثيراً
قشعريرة
غثيان
اعياء
ألم أسفل الظهر
حمى

🥼📚
خمسة تحاليل يجب ان تكون فيها العينه بعيدة عن الضوء المباشر وهي: -
• Beta-carotene
• Bilirubin
• Porphyrins
• Vitamin A
• Vitamin B6

🔹️تحليل جرثومة المعدة
( H. pylori) :

•جرثومة المعدة: هي بكتريا عصوية تصيب المعدة وتسبب مايعرف بجرثومة المعدة

الادوات المستخدمة في اجراء هذا التحليل:

🔬 اولا /في حال استخدامة عينة Stool

_قطعة براز (Stools)

_الكاسيت الخاص بهذا التحليل

_محلول بفر (HP Ag Buffer)

🔬طريقة العمل:

_نقوم بادخال لوب قطرة المحلول في عينة البراز وفي اكثر من مكان من العينة ومن ثم نضع اللوب في علبة المحلول ونعمل مزج لمدة ثلاث دقائق حتى يصبح محلول جديد متجانس

_نضع قطرتين من المحلول المتجانس في المكان المخصص لها في #الكاسيت

وننتظر لمدة 5 دقائق ونلاحظ النتائج

🔬ثانيا :
في حالة استخدام عينة سيرم

طريقة العمل:

_نضع قطرة سيرم وقطرة من المحلول البفري على الكاسيت ووننتظر لمدة 5ونلاحظ النتائج

فكرة الاختبار بكلا الطريقتين اعلاه👆هي:يقوم #الكاسيت بالكشف عن الانتجين Agالخاص بالجرثومة من خلال التفاعل بين ال Ag و Ab

🔬 النتائج في كلا الطريقتين تفسر كل الاتي:

🟢 الحالة الاولى :
اذا ضهر خط الكونترول C فقط يعني لاتوجد جرثومة ونكتب Nigtive

🟢 الحالة الثانية :
اذا ضهر خط الC وخط ال Test يعني توجود اصابة بجرثومة المعدة ونكتب Postive

شباب لو تكرمتم انشروا رابط القناه

https://t.me/labrot

‏أنواع الملاريا   MALARIA   الأربعة ومراحلها. 👆🏾👆🏾

ال Linearity لفحص ال HDL يساوي 1000mg/dl
لو تركيز كان أكثر من 1000mg/dl معناها النتائج حتكون خاطئة ( بلاقي لون العينة غامق و النتيجة قليلة ) وقتها ، و لازم أخفف العينة بnormal saline (NaCl 0.9%) و نعمل تخفيف 1:2 و بنعيد الفحص و بنضرب النتيجة في معامل التخفيف dilution factor اللي بيكون بيساوي 2

*****

🟥 الأمور اللي ممكن تأثر على الفحص هي :

- الHemoglobin أكتر من 500mg/dl
ركزووووا قولت أكترررر من 500mg/dl مش g/L

- ال Bilirubin (free) أكتر من 40mg/dl

- ال Bilirubin (conjugated) أكتر من 40mg/dl

- ال Ascorbic Acid أكتر من 50mg/dl

- ال Triglycerides أكتى من 1000mg/dl

🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨

========🟥 خامسا : ( VLDL ) 🟥========
************

🟥 ال VLDL اختصار ل :
very-low-density lipoprotein

🟥 ال VLDL بشكل رئيسي بيتشكل من الTg

🟥 تقريبا 80% من ال Tg موجود في الVLDL

🟥 الVLDL بشكل رئيسي بيقوم بحمل ال Tg

🟥 الVLDL بيتشكل في الكبد و بيدخل للدم و بيقوم بنقل الTg للأنسجة

🟥 ارتفاع الVLDL بنلاقي في حالة الCardiovascular disease و ال Atherosclerosis و ال stroke

🟥 قياس الVLDL مااااا بيكون عن طريق اختبار و فحص مباشر لاااااااااااا ،
بل بيكون عن طريق معادلة حسابية و هي :

🟩 VLDL = Tg ÷ 5

لكن ......
المعادلة هادي مااااااااااا بتنفع نطبقها في حالة كانت ال Tg أكثر من 400mg/dl

فبنطبق معادلة تااااانية و هي :
🟩 VLDL = Total cholestrol - HDL - LDL

🟥 ال Normal range لفحص ال VLDL هو :
between 2 and 30 mg/dL

🟥 سؤال : طيب لو أناااااا بديش النتيجة بال mg/dl بدي إياها بال mmol/L ، شوووو أعمل ؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
بسيطة جدااا بضرب الناتج في في العدد ( 0.0259 )

يعني مثلا لو ال VLDL كان = 25mg/dl ، بدي أحوله ل mmol/L :

25mg/dl × 0.0259 = 0.6475 mmol/L

****

🟥 مبدأ آلية الفحص Principle of the method
************

The reagent is based on the following reactions:

1. Elimination of non LDL-Cholesterol :

🟨 Cholesterol esters + H2O ---( Cholesterol esterase ) --> Cholesterol + fatty acids

🟨 Cholesterol + O2 ---( Cholesterol oxidase ) --->
Cholestenone + H2O2

🟨 H2O2 ----( Catalase ) ----> O2 + H2O

2. Specific measurement of LDL-Cholesterol after release of LDL-Cholesterol by detergents in Reagent 2.

🟨 Cholesterol ester + H2O ----( Cholesterol esterase )----> Cholesterol + fatty acid

🟨 Cholesterol + O2 ---( Cholesterol oxidase ) --->
Cholestenone + H2O2

🟨 H2O2 + 4- AA + TOOS ---( Peroxidase )--->
Quinone + H2O
The intensity of the quinone pigment produced is proportional to the cholesterol concentration when measured at 578 nm

🟥 بطلب من المريض يصوم من 12 إلى 14 ساعة و بعض المراجع بتقول من 10 إلى 12 ساعة

🟥 نوع العنية المطلوبة للفحص Type of sample :
************
1 - إما عينة Serum
2 - أو عينة بلازما تم فصلها من عينة دم في أنبوبة EDTA

و لاااااازم أتأكد إنه العينة ما تكون متحللة

🟥 سؤال فخم :
لووووو ما بدي أشتغل العينة في نفس الوقت و بدي أشتغلها بعدين لاحقا later في وقت آخر ، كم أقصى مدة بقدر أخلي العينة فيها من غير ما يتأثر ال HDL في العينة ؟؟؟؟؟!!

🟩 الجواب :

- لو ححفظ العينة على درجة 4 - 8 درجة مئوية ، عينة ال LDL حتكون عندي ثابتة لمدة أسبوع

- لو ححفظ العينة على درجة سالب 20 درجة مئوية ( 20- ) ، عينة الLDD حتكون عندي ثابتة لأكثر من أسبوع

🟥 لازم أضبط جهاز ال Sepctrophotometer على طول موجي :
578 nm

🟥 ححتاج ٣ أنابيب فحص فاضية
3 tubes

🟥 بعمل تصفير للجهاز من خلال ال Reagent blank

🟥 يفضل أعمل Quality control لجهاز ال Sepctrophotometer
من خلال عينة LDL معلومة التركيز

🟥 الشغل لازم يكون على درجة حرارة 37 درجة مئوية ، فبدي أتأكد إنه الحضانة incubator عندي درجة حرارتها 37 درجة مئوية

🟪 خطوات العمل Procedure
*******
- بنجيب ال 3 أنابيب و بنعلِّم على الأنبوبة الأولى بحرف ( B ) و الأنبوبة الثانية بحرف ( S ) و الأنبوبة الثالثة بحرف ( T ) :
🟦 Tube ( B ) = Blank
🟩 Tube ( C ) = Calibrator
🟥 Tube ( T ) = Test

و بنحط في كل أنبوبة 375 ميكروليتر من ال R1 Reagent

🟦 الأنبوبة Tube ( B ) بنخليها لتصفير الجهاز ....

🟩 الأنبوبة Tube ( C ) بعد ما حطينا عليها 375 ميكروليتر من ال R1 Reagent بنحط عليها 5 ميكروليتر من الCalibrator

🟥 الأنبوبة Tube ( T ) بنحط بعد ما حطينا عليها 375 ميكروليتر من ال R1 Reagent بنحط عليها 5 ميكروليتر من Serum أو Plasma المريض اللي بدنا نفحصله


- بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 5 دقايق
بنحط على ال3 أنابيب من ال R2 Reagent بمقدار 125 ميكروليتر على كل أنبوبة من الأنابيب الثلاثة
بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 3 دقايق
-- بعد انقضاء الوقت 3 دقايق في ال incubator ، بنصفر الجهاز على ال Tube ( B ) ، بعديييين بنقيس امتصاص Absorbance لكل من ال ال Tube ( C ) و ال Tube ( T )

بعدييييبن بنعمل المعادلة الحسبية التالية عشان نطلع قيمة ال LDL :

LDL-C mg/dl = (Abs. T ÷ Abs. S) × Calibrator concentration

***

🟥 القيم Values :
...........................
🟨 Lower than 130mg/dl = Normal

🟨 130 - 159 mg/dL = Border line high risk for Coronary heart disease (CHD)

🟨 More than 160 mg/dL = High risk for Coronary heart disease (CHD)

🟥 سؤال : طيب لو أناااااا بديش النتيجة بال mg/dl بدي إياها بال mmol/L ، شوووو أعمل ؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
بسيطة جدااا بضرب الناتج في في العدد ( 0.0259 )

يعني مثلا لو ال LDL كان = 50mg/dl ، بدي أحوله ل mmol/L :

120mg/dl × 0.0259 = 3.108 mmol/L

🔴 خطية الفحص Linearity of the test :
.........................................................
Linearity : is the ability to provide laboratory test results that are directly proportional to the concentration of the measurand (quantity to be measured) in a test sample.
الخطية : معناها القدرة على توفير نتائج الفحص المخبري في إنها تكون متناسبة طردياااا مع التركيز للعينة اللي بقيسها

يعني كل ما زاد التركيز بتزيد النتيجة

يعني كل ما زاد التركيز بتزيد النتيجة

ال Linearity لفحص ال HDL يساوي 150mg/dl
لو تركيز كان أكثر من 150mg/dl معناها النتائج حتكون خاطئة ( بلاقي لون العينة غامق و النتيجة قليلة ) وقتها ، و لازم أخفف العينة بnormal saline (NaCl 0.9%) و نعمل تخفيف 1:2 و بنعيد الفحص و بنضرب النتيجة في معامل التخفيف dilution factor اللي بيكون بيساوي 2

*****

🟥 الأمور اللي ممكن تأثر على الفحص هي :

- الHemoglobin أكتر من 500mg/dl
ركزووووا قولت أكترررر من 500mg/dl مش g/L

- ال Bilirubin (free) أكتر من 40mg/dl

- ال Bilirubin (conjugated) أكتر من 40mg/dl

- ال Ascorbic Acid أكتر من 50mg/dl

- ال Triglycerides أكتى من 1000mg/dl

****
🟥 سؤال : شوووووو هي الأسباب اللي بتؤدي لاتفاع ال HDL ؟؟؟

🟩 الجواب :
1 - أكل طعام بيحتوي على كمية عالية من الدهون المشبعة
saturated fats

2 - شرب كميات كبيرة من الكحول alcohol

3 - بعض الأدوية زي :
( corticosteroids, insulin, phenytoin, estrogen )

4 - فرط نشاط الغدة الدرقية Hyperthyroidism

5 - ممكن يكون السبب في الجينات

6 - الناس اللي هم من أصل ياباني Japanese ancestry بيكون عندهم ال HDL عالي و هاد سببه إنه ما بيكون عندهم بروتين اسمه
Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP)
و هاد البروتين لو صار فيه نقص بيصير في ارتفاع في الHDL

****
🟥 سؤال : شوووووو هي الأسباب اللي بتؤدي لانخفاض ال HDL ؟؟؟

🟩 الجواب :
1 - التدخين Smoking ، لإنه السجاير بتحتوي على مادة كيميائية اسمها acrolein ، المادة هادي بتغير من تركيب مادة الApolipoprotein A1 و مادة الApolipoprotein A1 بتدخل في تكوين ال HDL

2 - الأشخاص اللي بيعانوا من مقاومة الأنسولين Insulin resistance بنلاقي عندهم ال HDL منخفض

3 - بعض الأسباب الجينية زي :
- Tangier disease :
و فيها بيكون انعدام لوجود ال HDL أووو انخفاض كبير في ال HDL و كمان برضوووو ال LDL بيكون منخفض !!!

- ApoA1 deficiency :
و فيها بيكون انعدام لوجود أووو انخفاض كبير في الApolipoprotein A1 اللي بيدخل في تكوين ال HDL

- Familial combined hyperlipidaemia (FCH) :
و فيها بيكون الTg عالي و ال HDL منخفض و ال LDL عالي جدااااا

4 - بعض الأدوية زي :
beta blockers

thiazide diuretics

androgens

progestogens

anabolic steroids.

🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨

========🟥 رابعا : ( LDL ) 🟥========
********

🟥 ال LDL هي مجموعة رئيسية من من الجموعات الخمسة من ال :
groups of lipoprotein
و اللي هي :
1- Chylomicrons
2 - Very low-density lipoprotein (VLDL)
3 - Intermediate-density lipoprotein (IDL)
4 - Low-density lipoprotein (LDL)
5 - High-density lipoprotein (HDL)

🟥 ال LDL بيعنل على نقل ال fat molecules إلى الخلايا

🟥 كل particle من ال LDL بيحتوي على :
single apolipoprotein B-100 molecule (Apo B-100)

و ال apolipoprotein B-100 molecule (Apo B-100)
هو عبارة عن بروتين بيحتوي على 4536 حمض أميني amino acid !!!!!

🟥 حسب موقع ويكيبيديا بيقول إنه ال LDL particles بيتكون لماااا يتم إزالة الtriglycerides من الVLDL بواسطة إنزيم الlipoprotein lipase enzyme (LPL) ، فبيكون ال LDL اللي تكون أصغر smaller و لكن أكثر كثافة denser من ال VLDL

🟥 المريض اللي بيكون عنده ال LDL عالي معناااااها إنه بيكون عنده كمية كبيرة من LDL cholesterol في الدم ، الارتفاع هاد في الLDL بيؤدي لتكوين ترسبات plaque في الشرايين عنده و هااااادي الحالة بنسميها تصلب الشرايين atherosclerosis

_________

🟩 ملاحظة مهمة جدا جدا جداااااااااا :

أسهل طريقة أحسب بيها قيمة الLDL عن طريق معادلة Friedewald
و المعادلة هادي بتقول :
LDL = Total cholestrol - ( Tg ÷ 5 ) - HDL

و هاد بعد.ما أطلع نتيجة الTotal cholestrol و نتيجة الTg و نتيجة الHDL

🔴 لكن .......
لكن في حالات ما بينفع أعمل فيها القانون هاد زي :
1 - لووو كانت قيمة ال Tg أكتررررر من 400mg/dl

2 - المريض عنده hyperlipoproteinemia من النوع الأول و من النوع الثالث

غير هيك لو الطبيب طلب بسسس فحص LDL للتأكد لييييش اروح أعمل الTotal cholestrol و نتيجة الTg و نتيجة الHDL ؟؟ ، ما أعمل فحص ال LDL مباشر direct و خلص

_________

🟥 طيب سؤال : لييييش انا بعمل فحص ال HDL ؟؟؟

🟦 الجواب :
1 - عشان مستوى مستوى ال LDL بيوفرلي معلومات أولية أو تأكبدية عن صحة القلب و الشرايين

2 - الطبيب بيقيم فيها حالة المريض و استجابته للعلاج

3 - عشان الطبيب يوصف للمريض نمط معين يمشي عليه

و .... إلخ إلخ

هااااادول المكونين بيتفاعلوا مع كل من :
LDL + VLDL + chylomicron (CM)
و التفاعل حينتج عنه تثبيط أو إيقاف لعمل كل من ال
LDL + VLDL + chylomicron (CM)

و بالتالي بيخليهم مششششش قادرين يتفاعلوا مع إنزيمين و هم :
● cholesterol oxidase (CHOD)
● cholesterol esterase (CHER)

و الإنزيمين هادول هم اللي بيتفاعلوا مع ال HDL و بيعطوني نتيجته

فكان الفضل بعد الله تعالى في المكونين :
■ modified polyvinyl sulfonic acid (PVS)
■ polyethylene-glycol-methyl ether (PEGME)
اللي قاموا باالتفاعل مع كل من :
LDL + VLDL + chylomicron (CM)

و التفاعل هاد خلاهم مش قادرين يتفاعلوا مع الإنزيمين :
● cholesterol oxidase (CHOD)
● cholesterol esterase (CHER)
و هاد خلى الإنزيمين يتفاعلوا بسسس مع ال HDL عشان يعطوني نتيجته بسسسس
وااااااااااضحة بدهاش تفسير أكتر من هيك 😁

و عشان نوضح المعادلة ركزوا معاي يا أهل الخير :

■ HDL+LDL+VLDL+CM ---( PSV/PEGME )--->
HDL+ (LDL+VLDL+CM).PVS/PEGME

■ HDL + CHOD + CHER -----> Fatty Acid + H2O2

■ 2H2O2 + 4-AA + TODB ----> Quinone + 5 H2O

🟥 بطلب من المريض يصوم من 12 إلى 14 ساعة

🟥 نوع العنية المطلوبة للفحص Type of sample :
************
1 - إما عينة Serum
2 - أو عينة بلازما تم فصلها من عينة دم في أنبوبة EDTA
3 - أو عينة بلازما تم فصلها من عينة دم في أنبوبة Heparin

و لاااااازم أتأكد إنه العينة ما تكون متحللة

🟥 سؤال فخم :
لووووو ما بدي أشتغل العينة في نفس الوقت و بدي أشتغلها بعدين لاحقا later في وقت آخر ، كم أقصى مدة بقدر أخلي العينة فيها من غير ما يتأثر ال HDL في العينة ؟؟؟؟؟!!

🟩 الجواب :
أوووول حاجة لازم بعد ما أسحب من المريض عينة دم لاااازم أفصل العينة خلال 3 ساعات من وقت سحب الدم

- لو ححفظ العينة على درجة 4 - 8 درجة مئوية ، عينة الكوليسترول حتكون عندي ثابتة لمدة أسبوووووعين

- لو ححفظ العينة على درجة سالب 20 درجة مئوية ( 20- ) ، عينة الكوليسترول حتكون عندي ثابتة لشهر واحد فقط ، و في كيتات Kits ممكن تلاقيها كاتبة إنه العينة لا تحفظ في درجة التجميد not frozen

🟥 لازم أضبط جهاز ال Sepctrophotometer على طول موجي :
578 nm

🟥 ححتاج ٣ أنابيب فحص فاضية
3 tubes

🟥 بعمل تصفير للجهاز من خلال ال Reagent blank

🟥 يفضل أعمل Quality control لجهاز ال Sepctrophotometer
من خلال عينة HDL معلومة التركيز

🟥 الشغل لازم يكون على درجة حرارة 37 درجة مئوية ، فبدي أتأكد إنه الحضانة incubator عندي درجة حرارتها 37 درجة مئوية

🟪 خطوات العمل Procedure
*******
- بنجيب ال 3 أنابيب و بنعلِّم على الأنبوبة الأولى بحرف ( B ) و الأنبوبة الثانية بحرف ( S ) و الأنبوبة الثالثة بحرف ( T ) :
🟦 Tube ( B ) = Blank
🟩 Tube ( C ) = Calibrator
🟥 Tube ( T ) = Test

و بنحط في كل أنبوبة 450 ميكروليتر من ال R1 Reagent

🟦 الأنبوبة Tube ( B ) بنخليها لتصفير الجهاز ....

🟩 الأنبوبة Tube ( C ) بعد ما حطينا عليها 450 ميكروليتر من ال R1 Reagent بنحط عليها 5 ميكروليتر من الCalibrator

🟥 الأنبوبة Tube ( T ) بنحط بعد ما حطينا عليها 450 ميكروليتر من ال R1 Reagent بنحط عليها 5 ميكروليتر من Serum أو Plasma المريض اللي بدنا نفحصله


- بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 5 دقايق
بنحط على ال3 أنابيب من ال R2 Reagent بمقدار 150 ميكروليتر على كل أنبوبة من الأنابيب الثلاثة
بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 5 دقايق
-- بعد انقضاء الوقت 5 دقايق في ال incubator ، بنصفر الجهاز على ال Tube ( B ) ، بعديييين بنقيس امتصاص Absorbance لكل من ال ال Tube ( C ) و ال Tube ( T )

بعدييييبن بنعمل المعادلة الحسبية التالية عشان نطلع قيمة ال HDL :

HDL-C mg/dl = (Abs. T ÷ Abs. S) × Calibrator concentration

***

🟥 القيم Values :
...........................
🟨 Male : 35 to 80 mg/dl

🟨 Female : 42 to 88 mg/dl

🟥 سؤال : طيب لو أناااااا بديش النتيجة بال mg/dl بدي إياها بال mmol/L ، شوووو أعمل ؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
بسيطة جدااا بضرب الناتج في في العدد ( 0.0259 )

يعني مثلا لو ال HDL كان = 50mg/dl ، بدي أحوله ل mmol/L :

50mg/dl × 0.0259 = 1.295 mmol/L

🔴 خطية الفحص Linearity of the test :
.........................................................
Linearity : is the ability to provide laboratory test results that are directly proportional to the concentration of the measurand (quantity to be measured) in a test sample.
الخطية : معناها القدرة على توفير نتائج الفحص المخبري في إنها تكون متناسبة طردياااا مع التركيز للعينة اللي بقيسها

🟪 خطوات العمل Procedure
*******
- بنجيب ال 3 أنابيب و بنعلم على الأنبوبة الأولى بحرف ( B ) و الأنبوبة الثانية بحرف ( S ) و الأنبوبة الثالثة بحرف ( T ) :
🟦 Tube ( B ) = Blank
🟩 Tube ( S ) = Standard
🟥 Tube ( T ) = Test

و بنحط في كل أنبوبة واحد ميللي 1ml من ال Enzyme reagent

🟦 الأنبوبة Tube ( B ) بنخليها لتصفير الجهاز ....

🟩 الأنبوبة Tube ( S ) بعد ما حطينا عليها 1ml من ال Enzyme reagent بنحط عليها 10 ميكروليتر من ال :
Triglycerides Standard 200 mg/d

🟥 الأنبوبة Tube ( T ) بنحط بعد ما حطينا عليها 1ml من ال Enzyme reagent بنحط عليها 10 ميكروليتر من Serum أو Plasma المريض اللي بدنا نفحصله

- بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 5 دقايق

🔶️ ملاحظة : لوووووو ال incubator خربان بده تصليح و صيانة ممكن أحط العينات على درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقايق

- بعد انقضاء الوقت سواء 5 دقايق في ال incubator أو 10 دقايق على درجة حرارة الغرفة at room temperature ، بنصفر الجهاز على ال Tube ( B ) ، بعديييين بنقيس امتصاص Absorbance لكل من ال ال Tube ( S ) و ال Tube ( T )

- بعديييين بنيجي بنعمل معادلة حسابية بنحدد من خلالها كمية الكوليسترول ، و المعادلة هي كالتالي :

Triglycerides mg/dl = (Abs. T ÷ Abs.S) × 200

الرقم 200 في المعادلة هو تركيز الستاندرد
(Standard concentration)

🟩 ملاحظة : العينة ممكن تضلها صالحة للفحص على جهاز ال spectrophotometer بعد تجهيييزها لمدة 60 دقيقة بس تكون بعيدة عن الضوء ...

***

🟥 القيم Values :
...........................
🟨 Normal = <150 mg/dL ( < 1.70 mmol/L)

🟨 Borderlin = 150-199 mg/dL (1.70-2.25 mmol/L)

🟨 High = 240 mg/dl and above

🟨 Very high = ( >/= ) 500 mg/dL (( >/= ) 5.65 mmol/L)

🟥 سؤال : طيب لو أناااااا بديش النتيجة بال mg/dl بدي إياها بال mmol/L ، شوووو أعمل ؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
بسيطة جدااا بضرب الناتج في في العدد ( 0.0113 )

يعني مثلا لو ال Triglycerides كان = 150mg/dl ، بدي أحوله ل mmol/L :

150mg/dl × 0.0113 = 1.70 mmol/L

🔴 خطية الفحص Linearity of the test :
.........................................................
Linearity : is the ability to provide laboratory test results that are directly proportional to the concentration of the measurand (quantity to be measured) in a test sample.
الخطية : معناها القدرة على توفير نتائج الفحص المخبري في إنها تكون متناسبة طردياااا مع التركيز للعينة اللي بقيسها

يعني كل ما زاد التركيز بتزيد النتيجة

ال Linearity لفحص الTriglycerides يساوي 1000mg/dl
لو تركيز كان أكثر من 1000mg/dl معناها النتائج حتكون خاطئة ( بلاقي لون العينة غامق و النتيجة قليلة ) وقتها ، و لازم أخفف العينة بnormal saline (NaCl 0.9%) و نعمل تخفيف 1:2 و بنعيد الفحص و بنضرب النتيجة في معامل التخفيف dilution factor اللي بيكون بيساوي 2

*****

🟥 الأمور اللي ممكن تأثر على الفحص هي :

1- Lipemia (intralipid >2 g/L) may affect the results.
2- Hemoglobin may affect the results.
3- Other drugs and substances may interfere

***

🟥 تفسير النتائج Interpretation of the result :
___________

🟩 في حالة ارتفاع أو انخفاض مستوى الدهون الثلاثية
Increased or decreased serum triglycerides level
معناها في مشكلة طبية عند المريض و لازم تنعمل فحوصات إضافية additional tests للتشخيص النهائي for definitive diagnosis ،
يعني مثلا ممكن وقتها نعمل فحص آخر مع فحص الtriglyceride و هو فحص ال Cholestrol ،
و فحص ال Cholestrol و فحص الtriglyceride فحصين مستقلين عن بعضهم البعض بشكل كبير جداااا very independently ، يعني بقدرش أقرر نتيجة فحص منهم من خلال نتيجة الفحص الثاني ، لا لا لااااااا ، يعني مش معناها شوفت الtriglyceride بقول بما إنه الtriglyceride يبقى ال Cholestrol عالي !!!!! لااااا لاااااا لااااا هاظول فحصين مستقلين عن بعض

في حالة كان مستوى الCholestrol عالي high و كان مستوى الtriglyceride برضو عالي high فهاد معناه المريض ممكن بشكل كبير بيعاني من خطر مرض تصلب الشرايين atherosclerosis أو مرض الشريان التاجي coronary artery disease .

🟩 في حالة ارتفاع خفيف إلى ارتفاع متوسط في مستوى الدهون الثلاثية
Mild-to-moderate increasing in serum triglycerides level

و هاد الامر بيصير في عدة حالات زي انسداد القنوات الصفراوية biliary obstruction ، و مرض السكري diabetes ، المتلازمة الكلوية nephrotic syndrome ، أمراض الغدد الصماء endocrinopathies ، و الاستهلاك المفرط للكحول excessive consumption of alcohol

لما تكون الزيادة واضحة Markedly increased في مستوى الtriglyceride من غير سبب محدد without an identifiable cause ، بيكون المريض بيعاني من ارتفاع وراثي في البروتينات الدهنية ( congenital hyperlipoproteinemia ) و وقتها بيتطلب نعمل للمريض ( lipoprotein phenotyping ) عشان نأكد التشخيص .

🟩 في حالة انخفاض في مستوى الدهون الثلاثية
Decreased in serum triglycerides level
و هاد الأمر بيكون نادر و ممكن يكون سببه سوء تغذية أو بسبب ال (Abetalipoproteinemia )

و تعريفه :
Abetalipoproteinemia : Is an inherited disorder that impairs the normal absorption of fats and certain vitamins from the diet.
هو مرض وراثي بيصير فيه ضعف في امتصاص الدهون و الفيتامينات من الطعام

🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨

========🟥 ثالثا : ( HDL ) 🟥========
********

🟥 ال HDL بيعمل على نقل الكوليسترول الموجود في مجرى الدم و المترسب في الشرايين و الأوعية إلى الكبد Liver و بيسموه الكوليسترول الجيد Good cholestrol ، عشان هيك كل ما ازداد مستوى ال HDL هاد كل ما بيقل خطر الإصابة بأمراض القلب heart diseases .

🟥 زيادة تركيز جزيئات ال HDL بيقلل التراكمات اللي في جدران الشرايين اللي بتؤدي لتصلب الشرايين
Increasing concentrations of HDL particles are associated with decreasing accumulation of atherosclerosis within the walls of arteries .

🟥 زيادة تركيز جزيئات ال HDL بشكل كبيييير أمر خطر مش كوبس لإنهوالظراسات الحديثة أكدت إنه زيادة تركيز جزيئات ال HDL بشكل كبيييير بيكون مرتبط بزيادة خطر الوفاة increased mortality risk و زيادة خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية ، وخاصة في مرضى ارتفاع ضغط الدم
and an increased cardiovascular risk, especially in hypertensive patients.

🟥 حجم size ال HDL particle بيتراوح من 5nm إلى 17nm و على هيك بيكون ال HDL particle كأصغر particle في مجموعة الlipoprotein particles

🟥 صح إنه قولنا ال HDL بيعمل على نقل الكوليسترول الموجود في مجرى الدم و المترسب في الشرايين و الأوعية إلى الكبد Liver بس مش للكبد بس لااااااا ، بينقل الكوليسترول كمان للأعضاء اللي بتصنع الستيرويد steroidogenic organs زي الغدد الكظرية adrenal glands اللي بتتواجد فوق الكليتين و زي الخصيتين Testes و زي المبيض Ovary ، طيب لييييييييش ؟؟؟؟!!!

لييييش الHDL بينقل ال Cholestro من الدم للأعضاء اللي بتصنع الستيرويد steroidogenic organs ؟؟؟؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
لإنه الستيرويد أصلااا بيتصنع من الكوليسترول 👍

🟥 طيب سؤال : لييييش انا بعمل فحص ال HDL ؟؟؟

🟦 الجواب :
- عشان أقدر من خلاله أقيم صحة القلب و الأوعية الدموية
To assess your cardiovascular health

- عشان أقدر من خلاله أعرف هل حيكون في خطر الأصابة بأمراض القلب risk for heart disease

- قياس ال HDL و قياس ال total cholesterol لنفس العينة بيخلي الطبيب بسهولة يحسب نسبة الHDL cholesterol بالنسبة ل non-HDL cholesterol
Measuring HDL cholesterol and total cholesterol together in the same blood sample allows the doctor to easily calculate the ratio of HDL cholesterol to non-HDL cholesterol

و هاد أمر مهم جداااااا بيسمح للطبيب بتقييم صحة القلب و الأوعية الدموية من خلال معرفة الكمية التقريبية للكوليسترول الجيد و الكوليسترول السيء
This is important for assessing your cardiovascular health and allows the doctor to understand the relative amounts of good and bad cholesterols.

- فحص ال HDl بيلعب دور مهم جداااا في فحص ومراقبة وتشخيص المشاكل اللي تؤثر على القلب والأوعية الدموية والدورة الدموية .
Testing of HDL cholesterol can play a role in screening, monitoring, and diagnosing problems that affect your heart, blood vessels, and blood circulation.

🟥 مبدأ آلية الفحص Principle of the method
************
- العينة بيكون فيها كل من :
HDL + LDL + VLDL + chylomicron (CM)

أنا بدي بس أفحص ال HDL ، طيب شوووو العمل ؟؟!

🟩 الجواب :
بسيطة ال Reagent تبع فحص ال HDL بيحتوي على كل من :
■ modified polyvinyl sulfonic acid (PVS)
■ polyethylene-glycol-methyl ether (PEGME)

🟪 الدهون الثلاثية Triglycerides هي نوع شائع common من الدهون اللي بتمثل حوالي 95% من جميع الدهون الغذائية ، و دهون الإنسان الحيوانات و النبات بتحتوي على الدهون الثلاثية.

🟪 الدهون الثلاثية Triglycerides تعتبر هي المكونات الرئيسية لدهون الجسم في الإنسان والفقاريات الأخرى ، و كمان الدهون النباتية.

🟪 الTriglycerides بتشكل المصدر الرئيسي للطاقة بجانب ال Carbohydrates و بمجرد هضمها بتنتشر في الجسم في مجرى الدم عشان تستخدمها الخلايا كطاقة
Once digested, triglycerides circulate in the blood stream to be used as energy by the cells

🟪 ال Triglycerides بتلعب دور مهم جدااااا في تشكيل أغشية الخلايا cell membranes ، و كمان بتعتبر الشكل المخزن من الدهون داخل الجسم storage forms of lipids اللي بيتم استخدامها في توليد الطاقة للجسم

🟪 الكمية الزايدة من الTriglycerides بيتم تخزينها في دهون الجسم عشان يتم حرقها في الفترة ما بين الوجبات عشان تمد الجسم بالطاقة

🟪 لو كان الشخص بياكل عدد أكبر من من الكيلوجول kilojoules من الدهون اللي بيحرقها ، فالكمية الزايدة حتؤدي لزيادة الوزن أو السمنة ، و هاد حيؤدي لارتفاع مستوى الTriglycerides في الجسم

🟪 ارتفاع مستوى الTriglycerides بيكون مرتبط بظروف أو مؤشر عِلل غير صحية مرضية زي أمراض القلب heart disease ، و حالة ارتفاع الTriglycerides بنسميها ( hypertriglyceridemia )

🟥 طيب سؤال : لييييش انا بعمل فحص ال Triglycerides ؟؟؟

🟦 الجواب :
1 - عشان أحدد خطر الإصابة بمرض الشريان التاجي
To determine the risk of coronary artery disease

2 - لمراقبة ارتفاع الدهون في الجسم
To screen for hyperlipemia

3 - لمعرفة الاضطرابات اللي بتؤدي لتغير مستوى الدهون الثلاثية في الجسم
To identify disorders associated with altered triglyceride levels

🟥 مبدأ آلية الفحص Principle of the method
************
- بيتم تكسير Triglycerides عن طريق الإنزيم إلى جليسيرول و أحماض أمينية
Thetriglycerides are enzymatically hydrolyzed to glycerol and free fatty acids.

- الكوليسترول اللي تحرر بيتفاعل مع Glycerol-kinase و
Glycerol-3-phosphate oxidase
بينتج عنهم ال H2O2

The glycerol liberated reacts with Glycerol-kinase and Glycerol-3-phosphate oxidase yielding H2O2

- تركيز ال H2O2 بيتم تحديده عن طريق تفعل تندر Trinder’s reaction

Trinder reaction : Is the reaction between hydrogen peroxide and the phenol and aminoantipyrine to form a quinone (quinoneimine), catalyzed by the presence of a peroxidase

🔷️ معادلة التفاعل كالتالي :

🟥 Triglycerides + H2O ----( Lipase ) ----> Glycerol + fatty acid

🟥 Glycerol + ATP ----( Glycerol Kinase ) ----> Glycerol-3-phosphate + ADP

🟥 Glycerol-3-phosphate + O2 ----( Glycerol-3-phosphate oxidase ) ----> Glycerol-3-phosphate + ADP

🟥 2 H2O2 + Aminoantipyrine + 4-Chlorophenol ----( Peroxidase ) ----> Quinoneimine
+ HCl + 4 H2O

🟥 بطلب من المريض يصوم من 12 إلى 14 ساعة

🟥 بطلب من المريض إنه ما ياخد كحول لمدة 24 ساعة قبل الفحص

🟥 بطلب من المريض يوقف أخذ بعض الادوية اللي ممكن تؤثر على نتيجة الفحص زي :
antilipemics , steroids , estrogen and some diuretics

🟥 لااازم يتم فصل العينة خلال ساعتين من بعد سحبها

🟥 نوع العنية المطلوبة للفحص Type of sample :
************
1 - إما عينة Serum
2 - أو عينة بلازما تم فصلها من عينة دم في أنبوبة EDTA
3 - أو عينة بلازما تم فصلها من عينة دم في أنبوبة Heparin

🟥 سؤال فخم :
لووووو ما بدي أشتغل العينة في نفس الوقت و بدي أشتغلها بعدين لاحقا later في وقت آخر ، كم أقصى مدة بقدر أخلي العينة فيها من غير ما يتأثر الكوليسترول في العينة ؟؟؟؟؟!!

🟩 الجواب :
- لو ححفظ العينة على درجة 20 - 25 درجة مئوية ، عينة الTG حتكون عندي ثابتة لمدة 7 أيام

- لو ححفظ العينة على درجة 2 - 8 درجة مئوية ، عينة الTG حتكون عندي ثابتة لمدة 2 يوم ( يومين )

- لو ححفظ العينة على درجة سالب 20 درجة مئوية ، عينة الTG حتكون عندي ثابتة لعدة أشهر

🟥 لازم أضبط جهاز ال Sepctrophotometer على طول موجي :
505 nm

🟥 ححتاج ٣ أنابيب فحص فاضية
3 tubes

🟥 بعمل تصفير للجهاز من خلال ال Reagent blank

🟥 يفضل أعمل Quality control لجهاز ال Sepctrophotometer و بيكون عندي في ال kit :
Triglycerides Standard 200 mg/dl
عشان أعمل عليه Quality control

🟥 الشغل لازم يكون على درجة حرارة 37 درجة مئوية ، فبدي أتأكد إنه الحضانة incubator عندي درجة حرارتها 37 درحة مئوية

🟦 الأنبوبة Tube ( B ) بنخليها لتصفير الجهاز ....

🟩 الأنبوبة Tube ( S ) بعد ما حطينا عليها 1ml من ال Enzyme reagent بنحط عليها 10 ميكروليتر من ال :
Cholesterol Standard 200 mg/d

🟥 الأنبوبة Tube ( T ) بنحط بعد ما حطينا عليها 1ml من ال Enzyme reagent بنحط عليها 10 ميكروليتر من Serum أو Plasma المريض اللي بدنا نفحصله


- بعدين بنعمل Mix كويس للأنابيب و بنحطهم في الحضّانة incubator لمدة 5 دقايق

🔶️ ملاحظة : لوووووو ال incubator خربان بده تصليح و صيانة ممكن أحط العينات على درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقايق

- بعد انقضاء الوقت سواء 5 دقايق في ال incubator أو 10 دقايق على درجة حرارة الغرفة at room temperature ، بنصفر الجهاز على ال Tube ( B ) ، بعديييين بنقيس امتصاص Absorbance لكل من ال ال Tube ( S ) و ال Tube ( T )

- بعديييين بنيجي بنعمل معادلة حسابية بنحدد من خلالها كمية الكوليسترول ، و المعادلة هي كالتالي :

Cholesterol mg/dl = (Abs. T ÷ Abs. S) × 200

الرقم 200 في المعادلة هو تركيز الستاندرد
(Standard concentration)

🟩 ملاحظة : العينة ممكن تضلها صالحة للفحص على جهاز ال spectrophotometer بعد تجهيييزها لمدة 60 دقيقة

***

🟥 القيم Values :
...........................
🟨 Normal = Less than 200 mg/dl

🟨 Borderlin = 200 - 239 mg/dl

🟨 High = 240 mg/dl and above

🟥 سؤال : طيب لو أناااااا بديش النتيجة بال mg/dl بدي إياها بال mmol/L ، شوووو أعمل ؟؟؟؟!!!

🟩 الجواب :
بسيطة جدااا بضرب الناتج في في العدد ( 0.0258 )

يعني مثلا لو الكوليسترول = 200mg/dl ، بدي أحوله ل mmol/L :

200 mg/dl × 0.0258 = 5.16 mmol/L

🔴 خطية الفحص Linearity of the test :
.........................................................
Linearity : is the ability to provide laboratory test results that are directly proportional to the concentration of the measurand (quantity to be measured) in a test sample.
الخطية : معناها القدرة على توفير نتائج الفحص المخبري في إنها تكون متناسبة طردياااا مع التركيز للعينة اللي بقيسها

يعني كل ما زاد التركيز بتزيد النتيجة

ال Linearity لفحص الكوليسترول يساوي 1000mg/dl
لو تركيز كان أكثر من 1000mg/dl معناها النتائج حتكون خاطئة ( بلاقي لون العينة غامق و النتيجة قليلة ) وقتها ، و لازم أخفف العينة بnormal saline (NaCl 0.9%) و بنعيد الفحص و بنضرب النتيجة في معامل التخفيف dilution factor

***

🟥 من بعض أسباب ارتفاع ال Total cholestrol :
___________

1 - ارتفاع الوزن أو السمنة Excess weight or obesity

2 - السكري diabetes

3 - أمراض الكبد و الكلى liver or kidney disease

4 - قصور الغدة الدرقية hypothyroidism

5 - متلازمة المبيض متعدد الكيسات polycystic ovary syndrome

6 - الحمل و بعض الحالات اللي بتؤدي لارتفاع الهرمونات الأنثوية
pregnancy and other conditions that increase levels of female hormones

7 - الأدوية اللي بتزود من ال LDL و بتقلل ال HDL ، زي كل من :
progestins, anabolic steroids, and corticosteroids

... إلخ إلخ

🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨
🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨🟨

========🟥 ثانيا : ( Triglycerides ) 🟥========
*************

🟪 ال Triglycerides و اختصارها TG معناها بالعربي ( الدهون الثلاثية )

🟪 طيب ندخل على التعريف مباشرة :
Triglycerides : is an ester derived from glycerol and three fatty acids .
الدهون الثلاثية هي عبارة عن إستر بيكون مشتق من الجليسيرول و 3 أحماض دهنية .

- Ester : is a chemical compound derived from an oxoacid (organic or inorganic) in which at least one –OH hydroxyl group is replaced by an –O– alkyl (alkoxy) group
الإستر : هو عبارة عن مركب كيميائي مشتق من الأوكسو أسيد ( هو حمض بيحتوي على أكسجين ) و بيكون الأوكسو أسيد ( عضوي أو غير عضوي ) بيكون فيها على الأقل مجموعة واحدة من الهيدركسيل بيتم استبدالها بمجموعة alkoxy ( ال alkoxy هو عبارة عن مجموعة alkyl يعني سلسلة كربون و هيدروجين بترتبط بشكل استثنائي مع الأكسجين )

🟪 الأحماض الدهنية الثلاثة
3 fatty acids
اللي بيتكون منها ال Triglycerides مششش لااازم بالضرورة يكون إلهم نفس التركيب ، بالعكس ممكن يكون ال Triglycerides خليط بين أحماض دهنية مشبعة saturated و غير مشبعة unsaturated

🟪 ال Triglycerides بيتصنع في الامعاء الدقيقة small intestine ، و في الكبد Liver و في الأنسجة الدهنية Adipose tissues ،